IM-9 (外周血B淋巴細胞)
- 公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 進口,、國產(chǎn)
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/2/28 14:19:40
- 訪問次數(shù) 740
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0365 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| IM-9 (外周血B淋巴細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0365 |
商品介紹：
名稱 IM-9 (外周血B淋巴細胞) 別稱IM 9; IM9; GM04680 組織來源外周血，B淋巴細胞 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 生物安全等級2 [Cells contain Herpesvirus] 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~45 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ 受體表達情況growth hormone receptor; insulin receptor; calcitonin receptor 抗原表達情況CD11a+; CD19+; CD20+; CD38 -; CD49e+ 基因表達情況immunoglobulin |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
NOS1AP 基因全長ORF克隆
KLC3 基因全長ORF克隆
RFTN2 基因全長ORF克隆
FNDC7 基因全長ORF克隆
PRPF31 基因全長ORF克隆
CYP2A7 基因全長ORF克隆
ATG14 基因全長ORF克隆
FGB 基因全長ORF克隆
ALDH8A1 基因全長ORF克隆
GABRR1 基因全長ORF克隆
IM-9 (外周血B淋巴細胞)2 ug pRevTR pRevTR 低溫運輸，-20℃保存
變形桿菌成套生化鑒定管（BXWS） BXWS 13種*1套/盒*10盒
2 ug pcDNA3.1（+）/RFP pcDNA3.1（+）/RFP 低溫運輸,，-20℃保存
100次 植物種屬鑒定PCR Mix 4（質體 matK） Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100g 麥芽浸膏 Malt Extract 室溫陰涼干燥保存
50T 難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,，-20℃保存
5mL 滋養(yǎng)層細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
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