人清道夫受體SRB/CD36 ELISA試劑盒
- 公司名稱 上海拜力生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2024/1/5 14:58:45
- 訪問次數(shù) 998
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供貨周期 | 一個月 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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人清道夫受體SRB/CD36 ELISA試劑盒
人清道夫受體SRB/CD36 ELISA試劑盒必須為液體,不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,。
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們拜力生物的*培養(yǎng)基,,細胞培養(yǎng)更省心,!"
供應商 :拜力生物
貨期 :7-10天
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,,請注意在吸取標本 / 標準品,,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,,將會導致不同的 “預孵育"時間,,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā),;洗板后應盡快進行下步操作,,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,,同時要消除板底殘留的液體和手指印,,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標準品、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆,。請確配置標準品及工作液,,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),,以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,,每隔10分鐘),如顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,,在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性,。
如標本中待測物質(zhì)含量過高,,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù),。
要產(chǎn)品包括限制性內(nèi)切酶,,聚合酶,修飾酶,,各種載體,, Marker , 引物,,測序,,基因突變系統(tǒng),噬菌體呈現(xiàn),,蛋白質(zhì)工具(蛋白激酶,,磷酸酶,,糖生物學,蛋白酶),。該公司產(chǎn)品線主要分為以下九大方面:①限制性內(nèi)切酶,;②聚合酶與擴增技術(shù);③DNA修飾酶與克隆技術(shù),;④核酸,;⑤RNAi與RNA酶;⑥基因表達和蛋白純化技術(shù),;⑦感受態(tài)細胞,;⑧蛋白質(zhì)工具;⑨表觀遺傳學,。
◇ 液體類標本
標本必須為液體,,不含沉淀。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,,應再次離心。
◇ 血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 尿液,、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結(jié)合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結(jié)合物 半抗原反應 半抗原載體結(jié)合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質(zhì)/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細胞質(zhì)蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細胞裂解 組織提取 重組細胞因子
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學試劑 其它生化試劑
收到后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,。
(一)如果細胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,,打開細胞培養(yǎng)瓶,,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng),。
(二)如果細胞已長滿,,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來,。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,。一傳二,。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好,。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
標準蛋白表達服務
1. 克隆目標蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上;
2. 制備重組bacmid DNA,;
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細胞,,制備P1和P2病毒stock;
4. P2病毒滴度測定
5. 重組蛋白表達評估和條件優(yōu)化,;
6. 小規(guī)模蛋白表達和純化(500 ml培養(yǎng)物),;
7. 大規(guī)模蛋白表達和純化(可選)。
病毒制備服務
1. 克隆目標蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上,;
2. 制備重組bacmid DNA,;
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細胞,制備P1和P2病毒stock,;
4. P2病毒滴度測定(滴度108-109),;
5. 蛋白表達驗證,;
6. P3病毒制備(可制備3L重組桿狀病毒)。
儀器(Instruments),、細胞融合,、轉(zhuǎn)染、培養(yǎng)(Cell Fusion, Transfection, Culture),、體外翻譯(In vitro Translation),、抗體(Antibodies)、檢測試劑盒(ELISA & Detection Kits ELISA),、生物醫(yī)學相關(guān)(Biomedical),、蛋白質(zhì)、多肽&糖類(Proteins, Peptides & Sugars),、化學試劑(Chemicals),、分子生物(DNA Molecular Biology)
現(xiàn)在一般完整的試劑盒應該有一下幾個組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物),;
(3)酶的底物,;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中),;
(5)結(jié)合物及標本的稀釋液,;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,;
(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,,其濃度按加量及比色液的體積而異,,在板式ELISA中一般采用3mol/L。