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上海穩(wěn)轉株構建

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穩(wěn)轉株構建

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面,、系統(tǒng),、高質量的心血管相關疾病研究服務平臺”的創(chuàng)新型企業(yè),致力于搭建基礎醫(yī)學和臨床轉化服務體系并開展基于藥效學評價的臨床前CRO服務,,提供各種成熟的心血管疾病模式動物,。公司投資建立的動物實驗中心,建有清潔級,、SPF級動物實驗室,,面積約1800平米。為科研院所,、臨床科室及醫(yī)藥企業(yè)提供專業(yè)定制化的動物模型,、藥物篩選、藥理藥效評價,、安全性評價,、病理分析及分子生物學檢測等服務。

 

 申知心生物擁有專業(yè)的技術團隊,核心成員來自中科院,、復旦,、交大、同濟等國內(nèi)重點高校及科研機構,,并與心血管病研究所保持密切合作,,能夠提供完善的實驗技術咨詢與服務。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,,動脈粥樣硬化模型,,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,,心肌病動物模型,,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,,心血管模型,,心血管相關原代分離

上海穩(wěn)轉株構建

一、詳細介紹
        上海穩(wěn)轉株構建常規(guī)轉染技術可分為兩大類,,一類是是瞬時轉染,,一類是穩(wěn)定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,、雖然可以達到高水平的表達,,但通常只持續(xù)數(shù)天,在轉染后24-72小時內(nèi)(依賴各種不同的構建手段)分析結果,,常常用到一些報告基因系統(tǒng)如熒光蛋白,,β-半乳糖苷酶等來幫助檢測。穩(wěn)定轉染則是外源質粒DNA整合到宿主細胞染色體上,,使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白,,需要在瞬時轉染基礎上對靶細胞進行篩選或者應用高轉染效率的病毒。建立穩(wěn)定轉染細胞系時,,需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物對靶細胞進行篩選,,常見的抗性標志物有潮霉素(hygromycin)、嘌呤霉素(puromycin)和新霉素(neomycin),。篩選得到的細胞能夠穩(wěn)定表達目的蛋白,,可以用于目的蛋白的擴增和富集,或者得到穩(wěn)定沉默特定基因的細胞株,。



二,、服務項目及周期
 

 

服務編號

項目名稱

周期(工作日)

SCL001

載體構建及鑒定

10-14

細胞轉染及篩選

15-20

細胞單克隆化培養(yǎng)

20-30

RT-PCR、WB檢測

15

實驗報告整理

2



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