上海實時熒光定量PCR（Taqman探針法）

熒光定量PCR技術(shù)是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,，對PCR產(chǎn)物進行標(biāo)記跟蹤,，實時***反應(yīng)過程。隨著PCR 反應(yīng)的進行,，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),，收集一次熒光強度信號,，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進行分析,，可以得到熒光擴增曲線,，計算待測樣品初始模版的量。實時熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍,，運用該項技術(shù),，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量,、定量和定性分析,。

上海實時熒光定量PCR（Taqman探針法）

服務(wù)項目：
1．相對定量：包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴增,，采用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式,，一般采用2－ΔΔ Ct法進行計算。每個樣本重復(fù)三次,，一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物,。
2．定量：需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測目的樣本中的基因,，比對標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù),。

技術(shù)優(yōu)勢
1. 使用定量PCR儀中穩(wěn)定和常用的ABI7900HT、ABI stepone /plus、Roche 480,。
2. 核心試劑采用美國*KAPA試劑,，實驗結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好,。
3. 豐富的qPCR經(jīng)驗,，基因類別有DNA、mRNA,、miRNA,；物種類別有人、鼠,、雞,、牧草、酵母菌,、金黃色葡萄菌,、病毒上清液等等。

送樣要求：
細(xì)胞（≥106 ）,、組織（≥300mg）,、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料,，基因組DNA或總RNA（體積≥30μl,，濃度≥50 ng/μl）。

提交結(jié)果：
引物和探針及序列,，反轉(zhuǎn)錄膠圖,，原始數(shù)據(jù)（包括擴增曲線和熔解曲線）、數(shù)據(jù)分析結(jié)果及實驗報告,。