蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
貨號：PC0010
規(guī)格：2500T
保存：開封使用后請密封保存,，本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效,。

產(chǎn)品內(nèi)容：

產(chǎn)品簡介：
    考馬斯亮蘭 G-250 染料，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,，使染料的大吸收峰的位置（Imax）,，由 465nm 變?yōu)?595nm，在一定的濃度范圍內(nèi),，測定的吸光度值 A595 與蛋白質(zhì)濃度成正比,。Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響，樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá) 1M,，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá) 5mM，但受略高濃度的去垢劑影響,，需確保 SDS 的濃度低于 0.1%,，Triton X-100 低于 0.1%，Tween 20, 60, 80 低于 0.06%,。
    含去垢劑的樣品推薦使用索萊寶生產(chǎn)的 BCA 蛋白濃度測定試劑盒,。

操作說明：
一．微孔酶標(biāo)儀法
    1.  *溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取 10ul,，稀釋 250ul ,，使終濃度為 0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋,。但是為了簡便起見，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。
    2.  5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻,， 取 1ml 5×G250 染色液， 加入 4ml 雙蒸水,， 混勻成 1×G250染色液,，此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
    3.  將標(biāo)準(zhǔn)品按 0,2,4,6,8,12,16,20 微升分別加到 96 孔板中,，加 PBS 稀釋液補(bǔ)足到 20 微升,。
    4.  將樣品作適當(dāng)稀釋（好多做幾個梯度，如作 2 倍,、4 倍,、8 倍稀釋）,，加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點可能不很準(zhǔn)確,，所以盡可能的讓樣品點落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。
    5.  各孔加入 200 微升稀釋后的 1×G250 染色液,，室溫放置 3-5 分鐘,。
    6.  用酶標(biāo)儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度,。
    7.  根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中的蛋白濃度,。

二．分光光度計法
    如無酶標(biāo)儀，染色反應(yīng)可在離心管中進(jìn)行,，反應(yīng)液混勻后加入比色皿中,，使用分光光度計測定吸光值。

步驟如下：
    1.  取八支（或者更多）干凈的 10ml 離心管,，標(biāo)記上號,。
    2.  取 100ulBSA 加入 PBS 2.4ml 稀釋終濃度為 0.2mg/ml。
    3.  5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻,，取 10ml 5×G250 染色液,，加入 40ml 雙蒸水，混勻成 1×G250 染色液,，此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周,。
    4.  按下表加入試劑(以每孔 5ml 計，多余的用來清洗比色皿)

     5. 反應(yīng) 3 分鐘后測 OD 值,。為了實驗的準(zhǔn)確性,，可每間隔 2 分鐘加一管染色液，每間隔 2 分鐘測一管 OD值,。如下表：

相關(guān)產(chǎn)品：

PC0001 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品（ 5mg/ml ）
PC0015 5×G250( 蛋白定量用 )
PC0021 BCA 試劑
PC0030 Lowry 法蛋白濃度測定試劑盒
PC0020 BCA 法蛋白濃度測定試劑盒
R0010  高效 RIPA 組織 / 細(xì)胞快速裂解液
PR1600  預(yù)染低分子量蛋白 MARKER
R0050  核蛋白抽提試劑盒

蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒

參考文獻(xiàn)：
《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang,，Qian Liu，Menghan Du,，Yali Cui,，Lixia Zhang，Lili Guo,，Le Ma,，Mingwei Chen， 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影響因子:3.046 PMID:

《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan,，Li,，Xiumei Li，Tianhui Liu,，Shiheng Chen,，Huihui Liu,，Hui Wang，Kun Li,，Yajian Song,，Xuegang Luo，Junqi Zhao,，Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30986455