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G0170 細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒(MDC 法) Solarbio染色劑試劑盒
- 公司名稱(chēng) 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌 SOLARBIO/索萊寶
- 型號(hào) G0170
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 其他
- 更新時(shí)間 2016/10/14 15:12:05
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 900
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細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒(MDC 法)
貨號(hào):G0170
規(guī)格:100T
有效期 : 12個(gè)月有效,。
供應(yīng)商:Solarbio
產(chǎn)品 說(shuō)明 :
自噬(autophagy)是細(xì)胞受到刺激后吞噬自身的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器,,終將吞食物在溶酶體內(nèi)降解的過(guò)程,自噬體(autophagosome)為雙層膜包被的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu),,內(nèi)含細(xì)胞質(zhì),、長(zhǎng)壽蛋白質(zhì)和異常蛋白聚集物,損傷或多余細(xì)胞器如線(xiàn)粒體,、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和微體,、病毒和細(xì)菌等。
單丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一種熒光色素,,是嗜酸性染色劑,,通常被用于檢測(cè)自噬體形成的特異性標(biāo)記染色劑,其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng) 355nm,。阻斷濾光片波長(zhǎng) 512nm,。細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒(MDC 法), 適用于培養(yǎng)細(xì)胞的自噬染色,, 又稱(chēng)為 MDC 染色液,, 可與 EB 合用雙染,。
自備材料:
熒光顯微鏡,、低速離心機(jī)、EB ,、載玻片,、蓋玻片
操作步驟(僅供參考) :
( 一) 、MDC 單獨(dú)染色:
1,、 用去離子水稀釋10×Wash buffer至1×,。
2、 800g離心5min,,收集細(xì)胞,,用300~400µl的1×Wash buffer清洗細(xì)胞1次,,棄上清。
3,、 加入適量的1×Wash buffer重懸細(xì)胞,,計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至10 6 /ml。
4,、 取適量90µl的細(xì)胞懸液至新的EP管中,,加入10µl的MDC Stain,輕輕混勻,。
5,、 室溫避光染色15~45min。
6,、 800g離心5min,,收集細(xì)胞,用300~400µl的1×Wash buffer清洗細(xì)胞2次,,棄上清,。
7、 加入100µl的Collection buffer重懸細(xì)胞,,滴加于載玻片上并加蓋玻片,。
8、 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長(zhǎng)355nm,,阻斷濾光片波長(zhǎng)512nm),,計(jì)數(shù)并拍照。
( 二) ,、與EB 雙染色:
1,、 用去離子水稀釋10×Wash buffer至1×。
2,、 800g離心5min,,收集細(xì)胞,用300~400µl的1×Wash buffer清洗細(xì)胞1次,,棄上清,。
3、 加入適量的1×Wash buffer重懸細(xì)胞,,計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至10 6 /ml,。
4、 取適量90µl的細(xì)胞懸液至新的EP管中,,分別加入10µl的MDC Stain和0.2µM EB染色液,,輕輕混勻。
5,、 滴加于在玻片上,,室溫避光染色15~30min,,加蓋玻片。
6,、 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長(zhǎng)512nm),,計(jì)數(shù)并拍照。
染色結(jié)果:
正常細(xì)胞 細(xì)胞被均勻染成黃綠色熒光
凋亡細(xì)胞 染色質(zhì)濃縮,, 細(xì)胞核碎裂成點(diǎn)狀,, 被染
成大小不一、致密濃染的綠色顆粒
注意事項(xiàng):
1,、 MDC Stain和EB試劑有一定毒性,,請(qǐng)小心操作。
2,、 吖啶橙染色常與EB染色合用,,可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。
3,、 操作過(guò)程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。
4,、 為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
其他染色產(chǎn)品:
G1072 結(jié)晶紫甲醇溶液(2.5%) Solarbio 100ml
G1073 結(jié)晶紫飽和酒精溶液 Solarbio 100ml
G1064 結(jié)晶紫水溶液(0.1%) Solarbio 100ml
G1670 甲基綠-派洛寧染色液 Solarbio 100ml
G1535 淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Highman剛果紅法) 3×50ml
G1560 標(biāo)準(zhǔn)阿利新藍(lán)染色液(試劑盒) Solarbio 3×50ml
G1560 標(biāo)準(zhǔn)阿利新藍(lán)染色液(試劑盒) Solarbio 3×100ml
G1562 阿利新藍(lán)染色液(pH2.5) Solarbio 100ml