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牛類elisa試劑盒

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  • 公司名稱 上海美旋生物科技有限公司
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  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 更新時(shí)間 2016/1/18 14:48:34
  • 訪問(wèn)次數(shù) 703
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牛類elisa試劑盒

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牛類elisa試劑盒

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規(guī)格: 48T/96T

貯藏:2-8℃,避光防潮保存
有效期:6個(gè)月

用途:本產(chǎn)品僅供科研,,不能用于臨床診斷

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性能:
準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900,。
靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于10 pg/ml,。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均小于15%。

操作方法:

一,、雙抗體夾心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ ,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘,。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同),。

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌,。

4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。

5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。

6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+",、“-"號(hào)表示,。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng)性,。

二、間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,,4℃,;

2.次日洗滌3次;

3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,;

4.(同時(shí)做空白,、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,;

5.37℃孵育35-60分鐘,,洗滌;

6.zui后一遍用DDW洗滌,。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4,、5、6,。

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