H4細胞,人腦神經膠質瘤細胞
參考價 | ¥ 3160 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 上海通蔚實業(yè)有限公司
- 品牌
- 型號
- 產地 美國ATCC、國內各科研機構細胞庫
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2016/2/21 8:03:53
- 訪問次數 1449
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每管含有細胞數>5×105 cells/ml,,此細胞通過CD44, CD90免疫熒光染色驗證,,經測試不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。瓶裝提供H4細胞,人腦神經膠質瘤細胞,,培養(yǎng)、專業(yè)技術,、*,、質量保證、售后一條龍服務,。
【H4細胞,人腦神經膠質瘤細胞的一般過程準備工作】
準備工作的內容包括器皿的清洗,、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制,、分裝及滅菌,,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調試等,。
取材
在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),,經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程,。機體取出的組織細胞的*培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),。理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養(yǎng),實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),,分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),,腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應立即處理,,盡快培養(yǎng),,因故不能馬上培養(yǎng)時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,,置4℃的培養(yǎng)液中保存,。取組織時應嚴格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質,。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌,,為減少污染可用抗菌素處理。
【培養(yǎng)】將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng),。如系組織塊培養(yǎng),,則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基,。如系細胞培養(yǎng),,一般應在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數,按要求以一定的量(以每毫升細胞數表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基,。細胞進入培養(yǎng)器皿后,,立即放入培養(yǎng)箱中,使細胞盡早進入生長狀態(tài),。
正在培養(yǎng)中的細胞應每隔一定時間觀察一次,,觀察的內容包括細胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,,有無污染,,培養(yǎng)基的PH 是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養(yǎng)溫度和CO2 濃度也要定時檢查,。
一般原代培養(yǎng)進入培養(yǎng)后有一段潛伏期(數小時到數十天不等),,在潛伏期細胞一般不分裂,但可貼壁和游走,。過了潛伏期后細胞進入旺盛的分裂生*,。細胞長滿瓶底后要進行傳代培養(yǎng),將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng),。每傳代一次稱為“一代”,。二倍體細胞一般只能傳幾十代,而轉化細胞系或細胞株則可無限地傳代下去,。轉化細胞可能具有惡性性質,,也可能僅有不死性(Immortality)而無惡性。培養(yǎng)正在生長中的細胞是進行各種生物醫(yī)學實驗的良好材料,。
【凍存及復蘇】為了保存細胞,,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存,。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,,zui終保存于液氮中,。在極低的溫度下,細胞保存的時間幾乎是無限的,。
復蘇一般采用快融方法,,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,,使之在一分鐘內迅速融解,。然后將細胞轉入培養(yǎng)器皿中進行培養(yǎng),。
凍存過程中保護劑的選用、細胞密度,、降溫速度及復蘇時溫度,、融化速度等都對細胞活力有影響。
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