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ELISA試劑盒的影響因素

來源:上海通蔚實業(yè)有限公司   2016年06月14日 09:04  

    ELISA試劑盒,,即酶聯(lián)免疫法,。ELISA法具有靈敏度高,、特異性強、重復(fù)性好的特點,,并具有操作簡便,、無放射性危害的優(yōu)點,因而多年來廣泛應(yīng)用于各高校,、醫(yī)院,、血站和科研機構(gòu)的實驗室中。 
影響ELISA實驗的因素
我們技術(shù)人員通過幾年的實驗觀察,,認(rèn)為影響ELISA實驗的因素有如下三方面:
一,、試劑盒
1,、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價降低或失活,,結(jié)果不易判斷,。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,,實驗中空白對照OD值偏高或假陽性,;
2、酶結(jié)合物濃度過高,,也會導(dǎo)致OD值假性增高,。
二、試驗儀器
1,、加樣器是否經(jīng)過校正,,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,,吸取樣品不,,會使結(jié)果忽高忽低;
2,、每次洗板前,,應(yīng)檢查洗板機針孔有無堵塞。
三,、操作
1,、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,,以免造成試驗結(jié)果假性降低,;
2、加樣時注意勿觸及包被板底部,,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,;3、洗滌不充分,,會使結(jié)果假性增高,,過分洗滌呈假陰性;
4,、比色時應(yīng)保持包被孔底部無異物,、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時,,底部留有水汽,,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高;
5,、抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,,依賴于溫度與時間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,,溫度低于4℃,,影響反應(yīng)速度。
    總之,,由于ELISA試劑盒實驗的影響因素較多,,在實際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),,避免和排除各種因素的影響,,使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗結(jié)果。

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