EasyIso ^TM Mouse CD16/CD32 Blocker

4°C保存,，避免冷凍

PBS, 0.1% BSA

封閉FcR受體，降低抗體非特異性結(jié)合

EasyIso ^TM Mouse CD4 T cell Isolation Cocktail

4°C保存,，避免冷凍

PBS, 0.1% BSA

識(shí)別非CD4 T細(xì)胞抗體混合液,，標(biāo)記非目的細(xì)胞

EasyIso ^TM Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail

4°C保存,，避免冷凍

PBS, 0.1% BSA

去除記憶T細(xì)胞

EasyIso ^TM Streptavidin Nanobeads

4°C保存,，避免冷凍

PBS, 0.1% BSA

磁珠結(jié)合非CD4 T細(xì)胞，通過(guò)磁極去除

1

準(zhǔn)備脾臟單細(xì)胞懸液至指定濃度

1 x 10^8 cells/mL

2

加入EasyIso ^TM Mouse CD16/CD32 Blocker

100 μL/mL

3

加入EasyIso ^TM Mouse CD4 T cell Isolation Cocktail至樣品中

100 μL/mL

4

抗體和細(xì)胞孵育

常溫孵育7.5 min

5

加入EasyIso ^TM Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail

100 μL/mL

6

抗體和細(xì)胞孵育

常溫孵育2.5 min

7

震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads

混勻30 s

8

加Streptavidin Nanobeads至樣品中

100 μL/mL

9

輕柔混勻磁珠和細(xì)胞,，孵育

常溫孵育5 min

10

加入FACS Buffer到樣品中,，輕輕混勻

 總體積加入至2.5 mL （5 mL流式管）

總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管)

11

樣品置于磁力架上,，使磁珠吸附

單孔磁力架吸附（3 min）

聯(lián)排磁力架吸附（5 min）

12

傾斜磁力架,，將樣品倒入新的收集管中，收集樣品

細(xì)胞分離成功