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一,、產(chǎn)品簡介
英諾思小鼠naive CD4 T細胞分離試劑盒采用陰選的方式，通過無柱磁極分離小鼠脾臟中的na?ve CD4 T細胞,。分離過程中抗體和磁珠不會接觸na?ve CD4 T細胞，能夠最大限度保持T細胞最原始的狀態(tài)。
◎ 操作簡便
◎ 無需裂紅
◎ 純度最高可達99%
◎ 18-20分鐘完成分離
試劑盒通過生物su偶聯(lián)的抗體標記非na?ve CD4 T細胞,，再將細胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián),，然后通過磁極進行無柱分離。目標細胞只需倒入一個新的管中即可完成分離,，分離后的細胞可立即用于后續(xù)應(yīng)用,，如流式細胞術(shù)、細胞培養(yǎng)和功能實驗等,。
二,、試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso TM Mouse CD16/CD32 Blocker | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 封閉FcR受體,，降低抗體非特異性結(jié)合 |
EasyIso TM Mouse CD4 T cell Isolation Cocktail | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識別非CD4 T細胞抗體混合液，標記非目的細胞 |
EasyIso TM Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 去除記憶T細胞 |
EasyIso TM Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結(jié)合非CD4 T細胞，通過磁極去除 |
三,、操作步驟
步驟 | 說明 | 劑量和時間 |
準備脾臟單細胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL | |
2 | 加入EasyIso TM Mouse CD16/CD32 Blocker | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso TM Mouse CD4 T cell Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗體和細胞孵育 | 常溫孵育7.5 min |
5 | 加入EasyIso TM Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail | 100 μL/mL |
6 | 抗體和細胞孵育 | 常溫孵育2.5 min |
7 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
8 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
9 | 輕柔混勻磁珠和細胞,，孵育 | 常溫孵育5 min |
10 | 加入FACS Buffer到樣品中，輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL （5 mL流式管） 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
11 | 樣品置于磁力架上，使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附（3 min） 聯(lián)排磁力架吸附（5 min） |
12 | 傾斜磁力架,，將樣品倒入新的收集管中,，收集樣品 | 細胞分離成功 |
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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
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