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一,、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
小鼠B細(xì)胞分離試劑盒 采用陰選的方式,，通過無柱磁極分離小鼠脾臟中的B細(xì)胞,。分離過程中抗體和磁珠不會(huì)接觸B細(xì)胞,，能夠最大限度保持B細(xì)胞最原始的狀態(tài)。
• 操作簡(jiǎn)便
• 無需烈紅
• 純度最高可達(dá)99%
• 18-20分鐘完成分離
試劑盒通過生物su偶聯(lián)的抗體標(biāo)記非B細(xì)胞,，再將細(xì)胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián)，然后通過磁極進(jìn)行無柱分離。目標(biāo)細(xì)胞只需倒入一個(gè)新的管中即可分離,，分離后的細(xì)胞可立即用于后續(xù)應(yīng)用,，如流式細(xì)胞術(shù),、細(xì)胞培養(yǎng)和功能實(shí)驗(yàn)等,。
二,、試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲(chǔ)條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 封閉FcR受體,，降低抗體非特異性結(jié)合 |
EasyIso ™ Mouse B Cell Isolation Cocktail | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識(shí)別非 B細(xì)胞抗體混合液,，標(biāo)記非目的細(xì)胞 |
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結(jié)合非 B細(xì)胞，通過磁極去除 |
三,、操作步驟
步驟 | 說明 | 劑量和時(shí)間 |
1 | 準(zhǔn)備脾臟單細(xì)胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso™ Mouse B Cell Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗體和細(xì)胞孵育 | 常溫孵育10 min |
5 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
6 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
7 | 輕柔混勻磁珠和細(xì)胞,，孵育 | 常溫孵育5 min |
8 | 加入FACS Buffer到樣品中，輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL （5 mL流式管） 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
9 | 樣品置于磁力架上,，使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附（3 min） 聯(lián)排磁力架吸附（5 min） |
10 | 傾斜磁力架,，將樣品倒入新的收集管中，收集樣品 | 細(xì)胞分離成功 |
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