人肺炎支原體（MP）ELISA試劑盒操作說明

試驗原理：
        IFN-Α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IFN-Α濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IFN-Α和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中IFN-Α的濃度呈比例關(guān)系,。

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注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍干,，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL,，浸泡1min，洗板5次,。

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操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL,；

4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

結(jié)果判斷

 繪制標準曲線：在Excel工作表中,，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD值作縱坐標,，繪制出標準品線性回歸曲線,，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1.  準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900,。

2.  靈敏度：zui低檢測濃度小于0.1U/L。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

4.  重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃,，避光防潮保存,。

6.  有效期：6個月

免責(zé)聲明

1.   試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗,，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負責(zé),。

2.   嚴格按照說明書操作,，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān),。

   上海裕平生物科技有限公司主要經(jīng)營各種品牌檔次的ELISA試劑盒,，*，售后服務(wù)完善,。并提供免費代檢測,。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位。技術(shù)人員更好的為您服務(wù),。
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