豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　BS-8208 豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒

　　以下是天津本生豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理：

　　一,、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測樣本中的HB-EGF濃度,。通過包被抗體捕獲目標(biāo)蛋白,，再結(jié)合酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測定OD值,，濃度與吸光度呈正相關(guān),。

　　二、試劑盒組成

　　主要成分?

　　預(yù)包被微孔板

　　標(biāo)準品(通常含凍干粉,，需用稀釋液重構(gòu))

　　酶標(biāo)抗體,、顯色劑(A/B液)、終止液

　　濃縮洗滌液(需稀釋使用)

　　保存條件?

　　未開封試劑需2-8℃保存,，標(biāo)準品及樣本稀釋后建議分裝凍存(-20℃以下),，避免反復(fù)凍融。

　　三,、樣本處理

　　血清/血漿?：離心去除雜質(zhì)(1000×g,，15-20分鐘),，溶血樣本不可用。

　　組織勻漿?：需用PBS沖洗后勻漿,，離心取上清(5000×g,，5-10分鐘)。

　　細胞培養(yǎng)上清?：直接離心(1000×g,，20分鐘)后檢測,。

　　四、操作步驟

　　標(biāo)準品稀釋?：按說明書梯度稀釋(通常為2倍系列稀釋),。

　　加樣與溫育?：

　　每孔加入標(biāo)準品或樣本100μL,，37℃孵育1-2小時。

　　洗滌?：使用稀釋后的洗滌液洗板4-6次,。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB顯色液,，避光反應(yīng)10-15分鐘，后加終止液,。

　　檢測?：450nm波長讀取OD值,，繪制標(biāo)準曲線計算濃度。

　　五,、注意事項

　　避免試劑交叉污染,，不同批號組件勿混用。

　　顯色時間需嚴格控制,，強陽性樣本可能需進一步稀釋,。

　　實驗前需平衡所有試劑至室溫(約30分鐘)。

　　如需具體參數(shù)(如標(biāo)準品初始濃度,、靈敏度等),，請參考試劑盒配套說明書或咨詢技術(shù)老師。

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