以下是豬甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書綜合要點(diǎn)：

　　BS-4705  豬甘油三酯(TG)ELISA試劑盒

　　一,、檢測(cè)原理

　　采用雙抗體夾心法，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)下OD值,，顏色深淺與TG濃度呈正相關(guān),。

　　二,、試劑盒組成

　　包被抗體微孔板?：預(yù)包被豬TG特異性抗體

　　酶標(biāo)抗體?：HRP標(biāo)記的TG抗體

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度校準(zhǔn)液(需按說(shuō)明書稀釋)

　　TMB顯色液/終止液?：含底物和酸性終止劑

　　洗滌緩沖液?：20×濃縮液需蒸餾水稀釋

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：3000rpm離心10分鐘,，避免溶血

　　組織勻漿?：按1:5~10比例(重量/體積)加入PBS勻漿,，8000g離心取上清

　　細(xì)胞上清?：直接檢測(cè)或-20℃保存(避免反復(fù)凍融)

　　四,、操作步驟

　　平衡試劑?：冷藏試劑需室溫平衡15-30分鐘

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔：梯度加入50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)液

　　樣本孔：加入50μL待測(cè)樣本

　　孵育?：37℃反應(yīng)30-60分鐘，洗滌5次

　　顯色?：每孔加TMB底物100μL,，避光反應(yīng)15分鐘

　　終止與讀數(shù)?：加終止液50μL,，15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值

　　五、注意事項(xiàng)

　　質(zhì)量控制?：每板需設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)曲線復(fù)孔

　　干擾因素?：樣本中TG含量過(guò)高需稀釋(計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù))

　　儲(chǔ)存條件?：未開封試劑2-8℃保存,，開封板條需密封防潮

　　安全提示?：廢棄物按生物危害物處理

　　六、技術(shù)參數(shù)

　　檢測(cè)范圍?：通常為0.312-20ng/mL(不同品牌可能有差異)

　　靈敏度?：檢出限約0.1ng/mL

　　完整操作請(qǐng)以具體試劑盒說(shuō)明書為準(zhǔn),，部分品牌提供96孔/48孔兩種規(guī)格,。

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