細胞名稱 293[HEK-293] 人胚腎細胞
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現在明確了只存在其左側端的DNA,。經過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現,,Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主,??杀磉_異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成,。生物安全級別為2級,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:10~1:20傳代,每2~3天換液1次,。
傳代情況 P20 293[HEK-293] 人胚腎細胞
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:7,12,;D13S317:12,;D16S539:9,,13;D18S51:17,,18,;D19S433:15,18,;D21S11:28,,30.2;D2S1338:19,;D3S1358:15,,17;D5S818:8,,9,;D7S820:11;D8S1179:12,,14,;FGA:23;TH01:7,,9.3,;TPOX:11;vWA:16,,19,;
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶293[HEK-293] 人胚腎細胞
特點:細胞代數為4代以內
包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒,;外層防壓保溫氣泡袋,;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell,、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后7天,,如發(fā)現細胞有質量問題(如污染,死亡,,快遞運輸等原因)時,,應出具書面質量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決,!
奧陸生物與您攜手共進,!
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,,細胞生長狀態(tài)等具體情況,,酌情處理,如需要更詳細技術指導,,請及時或郵件,。
需要特別指出的是:如細胞出現問題,,請于48h內及時反饋,本公司將竭誠為您服務,!
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張),。
顯微鏡觀察細胞,,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理,。如未達到細胞傳代密度,,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
嚴格無菌操作,,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),,放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞),。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,,重懸細胞,。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng),。 Hela人宮頸癌細胞
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張),。
3. 嚴格無菌操作,,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),。
5. 1000rpm,5min離心,,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,,37℃,5%CO2 培養(yǎng),。
三.一毫升小管操作方法 小管內也是此細胞,。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
2. 嚴格無菌操作,,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻,。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細胞,。
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶,,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
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