如何選擇二抗-西美杰二抗產(chǎn)品解決全方案

二抗廣義上是指專門和一抗進(jìn)行特異性反應(yīng)和結(jié)合的抗體,，在免疫學(xué)反應(yīng)中，經(jīng)常需要針對試驗(yàn)選擇不同的二抗,，西美杰能為您的科研工作提供和zui全面的二抗產(chǎn)品,。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，同時(shí)在后繼試驗(yàn)中也會(huì)有不同的檢測方案,，因此在選擇二抗的時(shí)候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求,，一般來說，選擇合適的二抗需要需要從下面幾個(gè)方面考慮：

【一抗的種屬來源】

二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源,，例如：如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,，二抗則選抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,，則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗,。即根據(jù)一抗的物種來源選擇相應(yīng)的抗該物種的二抗。西美杰能為您提供zui全的抗不同種屬的*二抗,，包括抗小鼠,、大鼠、兔,、山羊,、綿羊、人,、豚鼠,、豬、馬,、牛,、雞、鴨等二抗,。

【一抗的類別亞型】

二抗需與一抗的類別或亞類相匹配,。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體,。其中單克隆抗體的類別及亞類通常會(huì)在產(chǎn)品說明書中都會(huì)有描述,，如果你的一抗是小鼠IgM,，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1,，IgG2a,，IgG2b，IgG3）,，那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗,，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1,，那么你可以選擇抗IgG1的二抗,，此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下,，可以選用抗相應(yīng)物種IgG,。西美杰能為您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者特異性只結(jié)合IgM的Anti IgM （mu） Antibody,、IgA的Anti IgA （alpha） Antibody,、IgE的Anti IgE （epsilon） Antibody等。

【二抗的種屬來源】

一般來說,，不同的種屬來源與二抗的質(zhì)量沒有必然的,，來源于山羊的二抗與來源于驢的二抗在一般的實(shí)驗(yàn)里沒有太多的差別。然而在一些特殊的實(shí)驗(yàn)里,，如雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)里,，如果其中一個(gè)一抗是山羊來源的，一個(gè)是小鼠來源的,，則相應(yīng)的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗,，這時(shí)候，二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的,。西美杰有相應(yīng)的驢來源的二抗,，非常適合做類似雙標(biāo)的免疫實(shí)驗(yàn)。

【二抗的耦聯(lián)標(biāo)記】

一般來講,，耦聯(lián)到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,，PAP），熒光基團(tuán)（FITC,、Rhodamine,、Texas Red、PE,、Rhodamine,、Dylight等）、生物素,、金顆粒,。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對于Western Blot和ELISA,，zui常用的二抗是酶標(biāo)二抗,；而細(xì)胞或組織標(biāo)記實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞免疫化學(xué)，組織免疫化學(xué)，流式細(xì)胞術(shù)）中通常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗,，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗,。如果想要更大程度的放大檢測信號(hào)，可以使用Biotin/Avidin檢測系統(tǒng),。在一些熒光檢測方案中,，則需要選擇不同的熒光標(biāo)記；而金顆粒標(biāo)記的二抗則更多的應(yīng)用于免疫電鏡中,。西美杰能為您提供上述所有不同類型標(biāo)記的二抗,。

【是否經(jīng)過血清吸附過的二抗】

為減少二抗與樣本的非特異性結(jié)合，西美杰還能為您提供不同血清吸附的*二抗,。如您的檢測樣本是人源的蛋白,，一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗,，如果您對實(shí)驗(yàn)的特異性要求很高,，那西美杰向您推薦經(jīng)過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗，這種二抗由于經(jīng)過人血清吸附而排除了與人源組織（如IgG等）可能發(fā)生非特異性反應(yīng)的IgG,，因此將非特異性結(jié)合降低到zui低,。如KPL的HRP Labled Anti-Rabbit IgG （H+L） Antibody, Human Serum Adsorbed二抗就是經(jīng)過人血清吸附過的。而Anti-Mouse IgG （H+L）, Extra Serum Adsorbed, Peroxidase-labele二抗則是經(jīng)過多種血清吸附過的二抗,。

【Anti-IgG還是Anti-IgG, F（ab’）2 fragment】

在一些如胸腺,、脾臟、血液的組織以及造血細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、B細(xì)胞等細(xì)胞內(nèi)，通常含有較多的Fc受體,，這時(shí)候選擇二抗時(shí)選擇Anti-IgG, F（ab’）2 fragment這樣的特異性二抗,，這樣就消除了由于Fc部分與IgG的非特異性結(jié)合。常規(guī)的Anti-IgG （H+L）二抗與IgG的重鏈和輕鏈都有結(jié)合反應(yīng),，即與IgG的Fc的F（ab’）2片段都能結(jié)合,；由于IgG、IgM,、IgA都有保守的輕鏈結(jié)構(gòu)域,，因此Anti-IgG （H+L）與它們都有交叉反應(yīng)。而Anti-IgG, F（ab’）2 fragment經(jīng)過了IgG Fc片段的吸附,，因此只與IgG的F（ab’）2片段結(jié)合,，然而IgG、IgM,、IgA都有保守的輕鏈結(jié)構(gòu)域,，因此與它們也有交叉反應(yīng),。

【Anti-IgG（H+L）,、Anti-IgG （gamma）,、Anti-IgM （mu）、Anti-IgA （alpha）】

在一些特殊的實(shí)驗(yàn)里,，只需要檢測樣本里的IgG或者IgM,，常規(guī)的Anti-IgG （H+L）由于與IgG的重鏈和輕鏈都有結(jié)合反應(yīng)，而IgG,、IgM,、IgA都有保守的輕鏈結(jié)構(gòu)域，因此不能特異性的檢測某種類型的IgG或者IgM,。這時(shí)候就需要針對特殊類型Ig分子的二抗,。如KPL的Anti-IgG （gamma）二抗是由Anti-IgG（H+L）與IgM、IgA等吸附后的二抗,，消除了能與后者結(jié)合的部分,。

西美杰備有全面的二抗現(xiàn)貨產(chǎn)品并能提供zui完整的二抗產(chǎn)品線。主要二抗品牌為zui大的二抗和底物生產(chǎn)廠商KPL以及前沿抗體生產(chǎn)商 ProteinTech,。按照標(biāo)記分,，有HRP、AP,、生物素等標(biāo)記二抗,，F(xiàn)ITC、TRITC,、Rhodamine,、Cy3/5、Dylight等熒光二抗,；按照檢測物種分,，有抗人、大鼠,、小鼠,、豬、驢,、綿羊,、山羊、小雞,、馬,、兔、倉鼠,、狗,、牛,，以及多種細(xì)菌類二抗；另外,，還有IgG,、IgA、IgM以及IgG（Fc）,、IgG（ab’）2等不同類型抗體,。

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