胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
試劑盒使用說明書
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上,。
2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和15%
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值
代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。
注意事項:
1. elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存,。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準,。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
5. 組織標本:切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
試劑盒組成:
elisa試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:900pg/ml | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
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