組蛋白提取試劑盒 

NobleRyder  EX9308 組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品貨號：EX9308

產(chǎn)品名稱：組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：組蛋白提取試劑盒

規(guī)格：50T ; 100T

儲存條件：2-8℃,，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder EX9308 組蛋白提取試劑盒產(chǎn)品介紹

組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應(yīng)用廣泛的方法以及相應(yīng)的試劑提取組蛋白。適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,，如腦,、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維,、脂肪,、肝臟、消化道,、腎臟,、心臟、肌肉,、血管,、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取組蛋白。提取過程簡單方便,。組蛋白提取產(chǎn)物的產(chǎn)量大約0.4mg每107個細胞或100mg組織,，不同的細胞和組織中，產(chǎn)量差異很大,。提取的蛋白可用于WesternBlotting,、蛋白質(zhì)電泳、組蛋白修飾實驗比如乙?；⒓谆?、sumoylation等下游蛋白研究,。

適用樣本：動物細胞/組織

使用前請注意：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以 2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存,。

2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時是固體狀態(tài),，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴，變成液體狀 態(tài)后離心至管底部再開蓋,。

3. 試劑拆封后請盡快使用完,！

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器,、勻漿機/勻漿器,、渦旋混勻器,、移液器,、冰箱,、冰盒,，PBS 緩沖液,、蛋白定量試劑盒， 離心管,、吸頭、一次性手套,。

產(chǎn)品特點：

1. 使用方便,，從細胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨,、反復(fù)凍融,、超聲破碎等前處理。

2. 提取過程簡單方便,。

3. 含蛋白穩(wěn)定劑,，提取的蛋白穩(wěn)定,。

4. 紫外檢測蛋白濃度時,，背景干擾低。

5. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化,。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨立的蛋白酶抑制劑，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性,。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶,、天冬氨酸蛋白酶,、丙氨酰-氨基肽 酶等。

操作步驟：

一,、使用注意事項

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,，以優(yōu)化實驗條件，取得優(yōu)良實驗效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,，避免開蓋時試 劑損失。

3. 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷,；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷,。整個過程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,，不影響使用,，溶解后正常使用。

5. 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完,，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液,。

6. 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

7. 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制 劑,，注意提取過程保持低溫操作,，縮短離心時間。

8. 禁止與其他品牌的試劑混用,，否則會影響使用效果,。

9. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

二,、細胞組蛋白提取

1. 提取液制備： 每 500μL 蛋白提取液 A 中加入 2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

2. 收集 5-10×106個細胞,，在 4℃,，1000×g 條件下離心 5-10min，小心吸取培養(yǎng)基,，盡可能吸干,。

3. 用冷 PBS 洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清,。

4. 每 5-10×106 個細胞中加入 500μL 冷的蛋白提取液 A,，混勻后，在 4℃條件下輕輕振蕩 10min,。

5. 在 4℃,，16000×g 條件下離心 15min，棄上清,。

6. 沉淀中加入 100μL 組蛋白提取液 B,。

7. 用 200μL 槍頭反復(fù)吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。

8. 置 4℃冰箱過夜存放,。

9. 16000×g 條件下離心 10min,，收集上清。

10. 在上清中加入 10-25μL 試劑 C 充分混勻,。

11. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸,，分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

三、組織組蛋白提取

1. 提取液制備： 每 500μL 蛋白提取液 A 中加入 2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用,。

2. 取 100mg 組織樣本剪碎,，加入蛋白提取液 A，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體,。

3. 將組織勻漿吸入一預(yù)冷的干凈離心管中,，在 4℃條件下輕輕振蕩 10min。

4. 在 4℃,，16000×g 條件下離心 15min,，棄上清。

5. 沉淀中加入 100μL 組蛋白提取液 B,。

6. 用 200μL 槍頭反復(fù)吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻,，置 4℃冰箱過夜存放,。

7. 16000×g 條件下離心 10min，收集上清,。

8. 在上清中加入 25μL 試劑C充分混勻,。

9. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,，不可用于診斷或治療,。

2. 最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理,。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗

組蛋白提取試劑盒 

產(chǎn)品訂購信息：

EX9308 組蛋白提取試劑盒 50T/100T