摘要：機(jī)體免疫功能受抑制時(shí)，單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞內(nèi)潛伏的或持續(xù)存在的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染會(huì)重新激活,。我們研究了甘草甜素,，環(huán)孢霉素A,和腫瘤壞死因子α對(duì)U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中感染的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的病毒DNA合成和抗原表達(dá)的作用。雖然在本研究中,，根據(jù)流式細(xì)胞儀和免疫熒光分析的結(jié)果,，甘草甜素對(duì)人類單核細(xì)胞系U-９３７細(xì)胞和人類胚胎肺細(xì)胞系MRC－５細(xì)胞中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的抗原表達(dá)都有抑制作用，用聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法仍可檢測到超早期的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）DNA,。環(huán)孢霉素A,和腫瘤壞死因子對(duì)U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中感染的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）沒有抑制作用,。U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的模型不僅有助于闡明持續(xù)感染的機(jī)制，而且也有助于闡明抗人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的化學(xué)因子的作用機(jī)制,。J.Leukoc.Biol.５５：２４－２８,；１９９４。

關(guān)鍵詞：巨細(xì)胞病毒,，甘草甜素,，U-９３７細(xì)胞，MRC－５細(xì)胞,，聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

引言

雖然人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染在人的一生中任何時(shí)候均會(huì)出現(xiàn),，每次感染的臨床特征卻各不相同。人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染zui常見的是引起先天的和圍生期的感染,，但它在輸血獲得性感染方面也占重要地位,，在器官移植病人，接受免疫移植劑化療的病人,，接受大劑量皮質(zhì)醇激素治療的病人,，或人類免疫缺陷病毒１型（HIV-1）感染的患者的發(fā)病率和死亡率方面也有舉足輕重的作用〔１〕,。巨細(xì)胞病毒原發(fā)感染通常是個(gè)良性的過程，但是從此病毒就會(huì)在宿主細(xì)胞中潛伏下來或持續(xù)存在,。一旦宿主的免疫功能受抑制時(shí),，這些潛伏或持續(xù)的感染就會(huì)被重新激活，產(chǎn)生多種多樣的臨床表現(xiàn),。單核－巨噬細(xì)胞系的細(xì)胞似乎是人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）潛伏或持續(xù)感染的主要場所〔２,，３〕,。但是,，在體外很難使人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在無癥狀的病毒攜帶者的外周血細(xì)胞中,，檢測不到巨細(xì)胞病毒的基因表達(dá)〔４－６〕,。我們成功地使該病毒的AD１６９株感染了人類單核細(xì)胞系U-９３７細(xì)胞，并獲得了一個(gè)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的臨床分離株〔７〕,。為了研究抗巨細(xì)胞病毒因子對(duì)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的U-９３７細(xì)胞中病毒重新激活的抑制作用,。因此，我們研究了甘草甜素,，環(huán)孢霉素A,和腫瘤壞死因子α對(duì)U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中感染的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的病毒DNA合成和抗原表達(dá)的作用,。

縮寫：ATCC，American Type Culture Collection,；CMV 巨細(xì)胞病毒,；CsA 環(huán)孢霉素A；EA 早期抗原,；GL甘草甜素,；HCMV 人類巨細(xì)胞病毒；HIV-1 ,，人類免疫缺陷病毒１型,；HLA,人類白細(xì)胞抗原；IEA,，超早期抗原,；IFA，免疫熒光分析,；IgG,，免疫球蛋白G；LA晚期抗原,；mAb,，單克隆抗體；MOI,，多重感染指數(shù),；PBS,，磷酸鹽緩沖液；PCR,，聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),；PKC，蛋白激酶C,；TNF-α,腫瘤壞死因子-α,；VZA，水痘－帶狀皰疹病毒

重印許可：日本,，Hokkaido,Sapporo 醫(yī)科大學(xué),，臨床醫(yī)學(xué)院，兒科系

材料和方法

細(xì)胞系和人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的擴(kuò)增：

U-９３７細(xì)胞單核細(xì)胞系是從美國類型培養(yǎng)樣品庫（American Type Culture　Collection,ATCC）獲得的,，并于加有１０％加熱滅活的胎牛血清,、２mM左旋谷氨酸、２５０U/ml青霉素和２５０ug/ml鏈霉素的RPMI１６４０培養(yǎng)基（Gibco產(chǎn)品）制成懸浮液（２x１０^５到２x１０^６）,。整個(gè)實(shí)驗(yàn)使用的都是從ATCC獲得的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的AD１

６９實(shí)驗(yàn)室株,。這一病毒在人類胚胎肺細(xì)胞（MRC－５細(xì)胞）中進(jìn)行擴(kuò)增，采集為細(xì)胞相關(guān)的,。人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的計(jì)數(shù)通過MRC－５細(xì)胞的噬菌斑分析而獲得,。為了增加感染率，我們將５x１０^５U-９３７細(xì)胞用聚凝胺（２ug/ml）置于５mlRPMI培養(yǎng)基中預(yù)處理２０分鐘,。然后將細(xì)胞進(jìn)行離心分離,，并重新懸浮于0.5ml無細(xì)胞的AD１６９病毒株中以1.0的多重感染指數(shù)（MOI）維持三小時(shí)。然后將細(xì)胞進(jìn)行再次離心,，以除去未結(jié)合的病毒,，用新鮮培養(yǎng)基沖洗三遍后再次進(jìn)行離心，然后再次懸浮于新鮮培養(yǎng)基中,。在２４小時(shí)的間隔期內(nèi),，細(xì)胞受到病毒攻擊，并在新鮮培養(yǎng)基中再次懸浮,。在其中的一些實(shí)驗(yàn)中,，培養(yǎng)基中含有不同濃度的甘草甜素，環(huán)孢霉素A,和腫瘤壞死因子α,，下面將進(jìn)一步解釋,。這樣，在多種培養(yǎng)基中,，多次進(jìn)行離心和用新鮮培養(yǎng)基懸浮,，使細(xì)胞得到清洗。0.1MOI的AD１６９株還被接種于１－打蘭培養(yǎng)瓶中,，后者帶有１２毫米直徑的鋪有一層MRC－５細(xì)胞的蓋玻片,。將培養(yǎng)瓶在室溫下以７００g進(jìn)行離心，然后培育三小時(shí),，以磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗三次以除去為結(jié)合的病毒,，然后在３７℃下培育４８小時(shí)。培育后,，將培養(yǎng)瓶用MicroTrak巨細(xì)胞病毒培育鑒定試劑染色（CA,Palo Alto,Syva公司生產(chǎn)）,。感染的MRC－５細(xì)胞的比例通過間接免疫熒光分析方法（IFA）檢測〔８〕。在含有甘草甜素,，環(huán)孢霉素A,和腫瘤壞死因子α的培養(yǎng)與作為對(duì)照的（不含藥物的AD１６９接種的U-９３７細(xì)胞）培養(yǎng)中,，免疫熒光染色人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期抗原（IEA）和早期抗原（EA）陽性細(xì)胞的比例被進(jìn)行了比較。

表面抗原的流式細(xì)胞儀分析：

細(xì)胞表面抗原的分析是通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析的,，使用了下列結(jié)合有熒光素的單克隆抗體（mAbs）：CD３,CD４,CD８,CD45R,Leu-15（Mac-1）,Leu-Mi,HLA-DR,和免疫球蛋白G的Fc段（CA,Mountain View ,Becton Dickinson公司生產(chǎn)）,。對(duì)每個(gè)樣品都用相應(yīng)的同位素特異的對(duì)照抗體進(jìn)行分析。我們使用了對(duì)數(shù)－線性轉(zhuǎn)換表對(duì)每個(gè)熒光色譜圖與其對(duì)應(yīng)的合適的熒光素標(biāo)記的同位素對(duì)照（IgG1-FITC;Becton Dickinson公司生產(chǎn)）進(jìn)行了比較,。在染色過程中，使用了人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期抗原和晚期抗原的單克隆抗體（CA,Temecula,化工公司生產(chǎn)）,。

藥物：

甘草甜素由東京Minophagen 制藥公司提供,。用0.01M磷酸鹽緩沖液溶解后，用１N的氫氧化鈉,，調(diào)節(jié)PH為７．２,。本實(shí)驗(yàn)使用的環(huán)孢霉素A是東京Sandoz公司贈(zèng)送的。腫瘤壞死因子－α是從Sigma化工公司購買的,。藥物對(duì)MRC－５細(xì)胞和U-９３７細(xì)胞的細(xì)胞毒性是通過對(duì)宿主細(xì)胞DNA的抑制,，見前面所述〔９〕。宿主細(xì)胞DNA合成的CD５０是定義為：減少５０％的對(duì)照細(xì)胞培養(yǎng)中結(jié)合的〔３H〕胸腺嘧啶核苷所需的藥物濃度,。

通過聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）DNA

如前所述進(jìn)行聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）〔１０〕,。用SS－苯基－氯仿提取蛋白質(zhì)后的，再用乙醇沉淀DNA,。在聚和酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中,，我們使用了合成的單核苷引物來擴(kuò)增人類巨細(xì)胞

圖１.   甘草甜素對(duì)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的抑制作用。在AD１６９病毒株感染的MRC－５細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入了不同濃度的甘草甜素,。將細(xì)胞培育４８小時(shí)后,，免疫熒光顯示人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的超早期抗原和早期抗原陽性的細(xì)胞數(shù)與對(duì)照細(xì)胞（培養(yǎng)基中不含甘草甜素）數(shù)進(jìn)行比較。以免疫熒光顯示含有甘草甜素的細(xì)胞數(shù)除以免疫熒光顯示不含有甘草甜素的細(xì)胞數(shù),，所得結(jié)果即為細(xì)胞百分?jǐn)?shù),。方塊，圓圈和三角符號(hào)代表三組不同的實(shí)驗(yàn),。

病毒（HCMV）中編碼主要超早期（IE）抗原（US３）的DNA序列,。設(shè)計(jì)了下面的單核苷作為PCR的引物：PIE－１（５'CAAGAGAAAGATGGACCCTGAT３',，核苷９８０－１００１）。其序列和位點(diǎn)在AD１６９HindIII片斷E上,。用作探針的合成單核苷是用Milligan７５００DNA合成儀制備的,，并用高壓液體組織化學(xué)攝影法純化。CDNA,，引物和試劑均在１００℃下加熱６分鐘,，然后加入2.5U Taq多聚酶（Perkin-Elmer Cetus公司生產(chǎn)），zui終的體積為１００ul,。操作循環(huán)記錄如下：１－３０個(gè)循環(huán)是使用一個(gè)DNA熱循環(huán)器（Perkin-Elmer Cetus公司生產(chǎn)）進(jìn)行,，在９４℃下進(jìn)行５分鐘（變性），５５℃下進(jìn)行２分鐘（退火）,，再在７２℃下進(jìn)行２分鐘（延伸）,。然后取10－２０ul PCR試劑混合物在３％NuSieve試劑和１％Seakem agarose試劑（FMC公司生產(chǎn)）中進(jìn)行分析。凝膠用溴化二氨乙苯啡啶染色,，并在印入Nytrand 膜（NH,Schleicher & Schuell公司生產(chǎn)）中前進(jìn)行檢查,。該膜依次用３２P和５'末端標(biāo)記的單核苷標(biāo)記。引物標(biāo)記的活性特定為１０^８－１０^９cpm/ug,。在５０℃下雜交一小時(shí),。將膜用溫水清洗１５分鐘，并用５５℃的水沖洗１５分鐘,，然后進(jìn)行自放射分析,。該人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）DNA引物的特異性和敏感性已在我實(shí)驗(yàn)室確立。

結(jié)果

用IFA和PCR方法分析的甘草甜素,，環(huán)孢霉素A和腫瘤壞死因子α對(duì)U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中感染的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的作用

用間接免疫熒光分析（IFA）方法分析可得,，甘草甜素在1.0mg/ml的濃度時(shí)對(duì)AD１６９感染MRC－５細(xì)胞有抑制作用，在10.0mg/ml的濃度時(shí)則對(duì)AD１６９感染MRC－５細(xì)胞有*抑制作用（參見圖１）,。MRC－５細(xì)胞中甘草甜素的CD５０是15.0mg/ml,。圖２A顯示了有或無AD１６９病毒株感染的MRC－５細(xì)胞中人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）IE DNA的擴(kuò)增過程。培養(yǎng)４８小時(shí)后,，從加有0.5到12.0mg/ml的各濃度甘草甜素的培養(yǎng)中,，用PCR法均可在人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）接種的MRC－５細(xì)胞中檢測到病毒IE DNA。圖２B顯示了人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的U-９３７細(xì)胞中病毒IE DNA的檢測結(jié)果,。U-９３７細(xì)胞中甘草甜素的CD５０是3.0mg/ml,。培養(yǎng)３小時(shí)后，從加有0.5到2.5mg/ml的各濃度甘草甜素的培養(yǎng)中,，用PCR法均可在人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）接種的U-９３７細(xì)胞中檢測到病毒IE DNA,。MRC－５細(xì)胞中環(huán)孢霉素的CD５０是５０ug/ml。１０到１０００U/ml的腫瘤壞死因子－α對(duì)有或無人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的MRC－５細(xì)胞的生存能力均無作用（數(shù)據(jù)未顯示）,。間接免疫熒光分析法和PCR法都沒有證實(shí)環(huán)孢霉素或腫瘤壞死因子－α對(duì)巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的MRC－５細(xì)胞有作用,。

對(duì)表面標(biāo)記的的流式細(xì)胞儀研究：

本研究中,，U-９３７細(xì)胞被分為兩個(gè)主要的亞群（G１亞群和G２亞群），如前所述,。培養(yǎng)三天后,，按有或無甘草甜素分別分析U-９３７細(xì)胞表面的抗原表達(dá)。G１亞群中的細(xì)胞主要表達(dá)Leu-M１和HLA-DR,而另一亞群（G２亞群）的細(xì)胞主要表達(dá)CD４,，CD45R,，Leu-１５，Leu-M１和HLA-DR,。加入的甘草甜素濃度較低時(shí)（0.5mg/ml）時(shí),，CD４陽性的細(xì)胞數(shù)是降低的，而甘草甜素濃度較高時(shí)（1.5mg/ml）時(shí),，CD４陽性的細(xì)胞數(shù)是輕度升高的（結(jié)果未顯示）,。AD１６９病毒株接種的U－９３７細(xì)胞中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期抗原和晚期抗原

圖２. （A） AD１６９病毒株感染的MRC－５細(xì)胞中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期DNA的擴(kuò)增結(jié)果，其中培養(yǎng)基中含有不同濃度的甘草甜素,。第I道和第II道顯示的是未感染的MRC－５細(xì)胞和甘草甜素濃度為12.0mg/ml時(shí)的未感染MRC－５細(xì)胞的結(jié)果,。第２，３,，４,，５，６,，７，８,，９道和第１０道分別顯示的是甘草甜素濃度分別為０,，0.5，1.0,，2.0,，4.0，6.0,，8.0,，10.0，和12.0mg/ml時(shí),，巨細(xì)胞病毒（HCMV）接種的MRC－５細(xì)胞的擴(kuò)增帶,。第１２道和第１３道分別顯示的是陽性對(duì)照AD１６９病毒株DNA和分子量標(biāo)記物的結(jié)果。（B）經(jīng)過三天含甘草甜素0.5到2.5 mg/ml的培養(yǎng)基培養(yǎng)后 ,，AD１６９病毒株感染的U-９３７細(xì)胞中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期DNA的擴(kuò)增結(jié)果,。第３，４,，５,，６,，７，８,，９道和第１０道分別顯示的是甘草甜素濃度分別為０,，0.5，1.0,，1.5,，2.0，和2.5mg/ml時(shí),，巨細(xì)胞病毒（HCMV）接種的U-９３７細(xì)胞的擴(kuò)增帶,。第２道和第９道分別顯示的是未感染的U-９３７細(xì)胞和甘草甜素濃度為2.5mg/ml時(shí)的未感染U-９３７細(xì)胞的結(jié)果。第１０道,，第I道和第II道分別顯示的是陽性對(duì)照（AD１６９病毒株DNA）和分子量標(biāo)記物的結(jié)果,。

通過標(biāo)記單克隆抗體，以流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測,，如表１所示,。在兩個(gè)組中，人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期抗原和晚期抗原都是通過標(biāo)記單克隆抗體以流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測的,，甘草甜素濃度均僅為0.5mg/ml,。在含有甘草甜素的培養(yǎng)基中與AD１６９病毒株一起培育三天后，G１亞群的細(xì)胞數(shù)降低了,，而G２亞群的細(xì)胞數(shù)則升高了,。培養(yǎng)基中甘草甜素濃度高于1.0mg/ml時(shí)，用流式細(xì)胞儀技術(shù)對(duì)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）接種的U-９３７細(xì)胞中超早期抗原和晚期抗原均檢測不到,。對(duì)U-９３７細(xì)胞環(huán)孢霉素A的CD５０是10.0ug/ml,。１０到１０００U/ml的腫瘤壞死因子－α對(duì)有或無人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的MRC－５細(xì)胞的生存能力均無作用（數(shù)據(jù)未顯示）。用環(huán)孢霉素A或腫瘤壞死因子處理后,，U-９３７細(xì)胞表面抗原的表達(dá)與zui初未處理的U-９３７細(xì)胞沒有差別,。有或無AD１６９病毒株感染的U-９３７細(xì)胞表面抗原的表達(dá)也很類似，只是CD４＋的細(xì)胞數(shù)不同,。AD１６９病毒株感染的U-９３７細(xì)胞中,，CD４＋的細(xì)胞數(shù)稍微少一些。表２顯示的是環(huán)孢霉素A或腫瘤壞死因子對(duì)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）AD１６９病毒株感染的U-９３７細(xì)胞（尤其是CD４＋和CD８＋細(xì)胞）的作用,。環(huán)孢霉素A或腫瘤壞死因子對(duì)U-９３７細(xì)胞中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）沒有抑制作用,。培養(yǎng)基中含環(huán)孢霉素A或腫瘤壞死因子時(shí)，在CD４＋和CD８＋的U-９３７細(xì)胞中可以檢測到人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的超早期抗原,。

討論

雖然已經(jīng)知道人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）可以感染人類淋巴細(xì)胞中的T細(xì)胞和B細(xì)胞,，自然殺傷細(xì)胞，和巨噬細(xì)胞，人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）潛伏感染和持續(xù)感染的實(shí)際部位和再激活的機(jī)制仍有爭議〔２,，１１－１３〕,。在一項(xiàng)原位雜交的研究中，結(jié)果顯示在血清學(xué)陽性的健康個(gè)體的單核細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞中檢測到了病毒的核酸〔５〕,。單核－巨噬細(xì)胞系被認(rèn)為是人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）潛伏感染的部位〔３〕,。也有報(bào)道指出，單核細(xì)胞zui終分化為組織巨噬細(xì)胞對(duì)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的進(jìn)入是必要的〔３,，１４〕,。U-９３７細(xì)胞中巨細(xì)胞病毒基因組的表達(dá)是多變的，這可能可以用細(xì)胞個(gè)體的差異來解釋〔１５〕,。一些體外實(shí)驗(yàn)表明,，人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）在一些外周血單個(gè)核細(xì)胞中的復(fù)制只限于超早期蛋白的

表１.在有或無甘草甜素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)７２小時(shí)后，用流式細(xì)胞儀檢測到的U-９３７細(xì)胞中人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）抗原的表達(dá),。

表２.          培養(yǎng)三天后,，用流式細(xì)胞儀檢測到的CD４＋或CD８＋的U-９３７細(xì)胞中人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）超早期抗原（CD４＋或CD８＋細(xì)胞中超早期抗原陽性的百分?jǐn)?shù)）。

表達(dá)〔５〕.通常,，人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的巨噬細(xì)胞的上清液中不含病毒的后代,。

用PCR法擴(kuò)增DNA已經(jīng)成功地運(yùn)用于臨床診斷中，以檢測不同標(biāo)本中的人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）,。然而,，從本研究中可以看出，該系統(tǒng)應(yīng)該更準(zhǔn)確地定義為定量PCR,，而不是定性PCR,。在LA（HBLF４或US１４）基因組附近的大量片斷對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)中病毒的復(fù)制是非必須的〔１６〕。Demmler等人〔１７〕評(píng)價(jià)了設(shè)置兩個(gè)引物,，用于擴(kuò)增人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）的超早期抗原和晚期抗原基因的DNA,。超早期產(chǎn)物是用來轉(zhuǎn)換病毒基因組的，使其脫離受感染細(xì)胞中限制性表達(dá)的狀態(tài),。人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）可以與人類陰莖包皮中的成纖維細(xì)胞表面的一個(gè)受體特異地結(jié)合，結(jié)合能力中等〔１８〕,。雖然U-９３７細(xì)胞表面具有Fc和C３的受體,，并且缺少表面及細(xì)胞內(nèi)免疫球蛋白〔１９，２０〕,，本研究并不能解釋巨細(xì)胞病毒進(jìn)入單核細(xì)胞是通過IgG的Fc段受體介導(dǎo)的,。使用流式細(xì)胞儀技術(shù)，可以在CD４＋和CD８＋的U-９３７細(xì)胞中檢測到巨細(xì)胞病毒的超早期抗原,，正如前面一項(xiàng)對(duì)外周血淋巴細(xì)胞的研究中所述〔２〕,。

目前已經(jīng)有一些抗病毒因子，僅表現(xiàn)出抗病毒特異的代謝過程的活性,，而沒有細(xì)胞毒性,。不幸的是,，目前還沒有發(fā)展針對(duì)巨細(xì)胞病毒感染的成功治療。甘草甜素是一種抗炎物質(zhì),，同時(shí)具有抗病毒活性〔２１,，２２〕。而且,，在日本已經(jīng)聲稱甘草甜素對(duì)慢性活動(dòng)性肝炎具有一定的治療和預(yù)防作用,。還有報(bào)道甘草甜素對(duì)單純皰疹病毒和水痘－帶狀皰疹病毒顆粒有滅活作用。甘草甜素還能抑制U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞中人類巨細(xì)胞病毒的復(fù)制,。由于甘草甜素在感染９６小時(shí)后加入仍有效,，可能能抑制病毒從感染細(xì)胞中向未感染細(xì)胞中擴(kuò)散（結(jié)果未顯示）。甘草甜素還可對(duì)HIV－１的復(fù)制有劑量依賴性的抑制作用〔２１,，２２〕,。雖然蛋白激酶C（PKC）在HIV－１的復(fù)制過程中的確切作用尚且未得可知，但HIV－１病毒顆粒與細(xì)胞表面受體的結(jié)合似乎需要蛋白激酶C（PKC）的參與,，因?yàn)?/span>CD４是由蛋白激酶C（PKC）進(jìn)行磷酸化的〔２３－２５〕,。

Baba和Shigeta認(rèn)為，甘草甜素可以抑制水痘－帶狀皰疹病毒顆粒的穿透細(xì)胞,，脫去衣殼,，或釋放過程。甘草甜素可能也是通過以上的某一項(xiàng)機(jī)制抑制人類巨細(xì)胞病毒在MRC－５細(xì)胞中的復(fù)制,。根據(jù)間接免疫熒光分析,，流式細(xì)胞技術(shù)和PCR技術(shù)檢測結(jié)果的不同，通過用含有甘草甜素的培養(yǎng)基培養(yǎng)人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的U-９３７細(xì)胞和MRC－５細(xì)胞,，病毒蛋白的合成和病毒在細(xì)胞間的擴(kuò)散可能會(huì)受到影響,。接受環(huán)孢霉素和其他藥物免疫抑制治療的患者存在嚴(yán)重人類巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的危險(xiǎn)。環(huán)孢霉素還可能對(duì)HIV－１感染T淋巴細(xì)胞和在其內(nèi)復(fù)制有抑制作用,，可能是通過干擾病毒與特異的細(xì)胞受體的結(jié)合而起作用的〔２７〕,。除了對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用外，腫瘤壞死因子還有其他的一些生物學(xué)活性,，比如抗病毒作用〔２８〕,。關(guān)于用甘草甜素對(duì)細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理的研究正在進(jìn)行中。