生物層干涉術(shù)（Biolayer Interferometry, BLI）是一種非標(biāo)記的,、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的先進(jìn)技術(shù)，主要用于生物分子間或是生物分子與小分子間相互作用分析,。在蛋白與配體的相互作用檢測(cè)時(shí),，基于傳統(tǒng)細(xì)胞表達(dá)的蛋白樣品通常需要經(jīng)過復(fù)雜的細(xì)胞破碎、純化等前處理,。然而在本案例中,，通過無細(xì)胞表達(dá)技術(shù)獲得的重組蛋白，實(shí)現(xiàn)了上清液零處理直接BLI檢測(cè),！

1.高可溶表達(dá)：SDS-PAGE清晰顯示,，3個(gè)蛋白在無細(xì)胞表達(dá)上清液中均呈現(xiàn)強(qiáng)目的條帶（圖1）,，傳統(tǒng)大腸桿菌系統(tǒng)中易形成的包涵體難題被破解！

2.低背景：蛋白3經(jīng)BLI（生物膜層干涉技術(shù)）檢測(cè)顯示：帶His標(biāo)簽的目的蛋白與背景信號(hào)區(qū)分度高（圖3）,，表明表達(dá)產(chǎn)物背景干擾小，無需復(fù)雜純化即可直接用于下游結(jié)合實(shí)驗(yàn),。

3.強(qiáng)親和活性：最令人振奮的是——蛋白2與其配體蛋白的BLI實(shí)時(shí)結(jié)合曲線顯示典型高效結(jié)合特征,，表明該蛋白具有強(qiáng)親和活性！這種無細(xì)胞快速表達(dá)+BLI快速檢測(cè)親和活性的方案,，將為藥物靶點(diǎn)蛋白篩選貢獻(xiàn)新速度,。