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流式細(xì)胞術(shù)“顯色神器”:SureLight® R-Phycoerythrin(D5-000)全解析

來源:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司   2025年07月11日 10:01  


RPE-Spectra_D5-000.jpg

??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

貨號:D5-000  

品名:SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白)  

規(guī)格:10mg,、50mg、100mg,、500mg

品牌:columbia biosciences

類型:基因工程優(yōu)化型藻紅蛋白(Phycoerythrin, PE)  

來源:通過紅藻(如紫球藻)藻膽蛋白基因重組表達(dá),經(jīng)純化工藝制備的高純度熒光蛋白,。  

應(yīng)用領(lǐng)域:流式細(xì)胞術(shù)(FCM),、熒光免疫分析(如ELISA、免疫組化),、單細(xì)胞測序標(biāo)記,、多色熒光檢測等。  


??詳細(xì)介紹:從紅藻到實(shí)驗(yàn)室的“顯色明星”  

SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白) (D5-000)是一種經(jīng)典的熒光標(biāo)記物,,其核心功能是通過吸收特定波長光能并發(fā)射更長波長的熒光,,實(shí)現(xiàn)對生物樣本(如細(xì)胞、組織)的可視化檢測,。  

它的“出身”自帶優(yōu)勢——以紅藻中的天然藻紅蛋白為模板,,通過基因工程技術(shù)優(yōu)化了蛋白折疊效率和色素分子(藻膽素)結(jié)合能力,最終得到的R-PE純度≥95%(HPLC檢測),,熒光量子產(chǎn)率較傳統(tǒng)提取的PE提升約30%(數(shù)據(jù)來源:Columbia Biosciences內(nèi)部測試),。  

從光譜特性看,D5-000的最佳激發(fā)波長為480-490nm(適配主流488nm氬離子激光器),,發(fā)射波長為565-575nm(覆蓋PE-Texas Red雙色檢測窗口),,這使得它在流式細(xì)胞術(shù)中既能單獨(dú)標(biāo)記目標(biāo)分子,也能與FITC(綠光),、PerCP(橙光)等染料組成多色panel,,輕松區(qū)分復(fù)雜樣本中的不同細(xì)胞亞群。  


??核心優(yōu)勢:為什么科研人更愛D5-000,?  

1. 高亮度,,低背景:優(yōu)化的藻膽素-蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)減少了非特異性熒光淬滅,,相同濃度下熒光強(qiáng)度比市售普通PE高25%-40%(第三方實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證數(shù)據(jù)),尤其在低豐度蛋白標(biāo)記時優(yōu)勢顯著,。  

2. 穩(wěn)定性強(qiáng):凍干粉形態(tài)在-20℃避光條件下可保存24個月(開封后建議6個月內(nèi)用完),,溶液狀態(tài)(PBS緩沖液,pH7.4)4℃避光可穩(wěn)定保存3個月,,避免傳統(tǒng)PE易氧化失活的問題,。  

3. 低內(nèi)毒素,生物相容性高:生產(chǎn)全程采用無動物源培養(yǎng)基,,內(nèi)毒素含量<0.1EU/μg(LAL檢測),,適用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)或臨床級檢測試劑開發(fā)。  

4. 兼容性強(qiáng):與主流流式細(xì)胞儀(如BD FACSCanto,、Beckman CytoFLEX),、熒光顯微鏡(如Leica SP8)及酶標(biāo)儀(如Tecan Infinite)均匹配,無需額外調(diào)整儀器參數(shù),。  


?購買疑問&專業(yè)解答  

Q1:D5-000是凍干粉還是液體,?如何溶解?  

A:提供凍干粉和預(yù)溶溶液兩種規(guī)格,。凍干粉建議用無菌PBS(pH7.4)或廠商推薦的緩沖液溶解,,輕柔渦旋至溶解,避免劇烈震蕩導(dǎo)致蛋白變性,。  

Q2:流式細(xì)胞術(shù)中使用D5-000,,需要調(diào)整激光器功率嗎?  

A:無需額外調(diào)整,。其最佳激發(fā)波長為488nm,,主流流式細(xì)胞儀的488nm氬離子激光器或固態(tài)激光器均可高效激發(fā),建議激光功率設(shè)置為100-200mW(具體以儀器說明書為準(zhǔn)),。  

Q3:多色實(shí)驗(yàn)中,,D5-000適合和哪些染料搭配?  

A:推薦與FITC(激發(fā)488nm/發(fā)射525nm),、PerCP-Cy5.5(激發(fā)488nm/發(fā)射670nm),、APC(激發(fā)633nm/發(fā)射660nm)等染料組合,避免與發(fā)射光譜重疊的染料(如Cy5)共用,,防止串色,。  

Q4:儲存時需要注意什么?  

A:凍干粉需-20℃避光密封保存(可用鋁箔包裹離心管),;溶解后的溶液建議分裝為小份,,4℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。  

Q5:是否提供批次間一致性驗(yàn)證報告,?  

A:是的,!每批次產(chǎn)品均經(jīng)過HPLC純度檢測、熒光量子產(chǎn)率測定及功能驗(yàn)證(如流式細(xì)胞術(shù)標(biāo)記效率測試),,報告可在下載或聯(lián)系客服獲取,。  

Q6:能否用于體內(nèi)成像?  

A:D5-000內(nèi)毒素極低(<0.1EU/μg),,理論上可用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn),,但建議先通過預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其組織分布和代謝特性(不同物種可能存在差異)。  

Q7:如果標(biāo)記抗體時出現(xiàn)沉淀,,怎么辦,?  

A:可能是抗體濃度過高或緩沖液pH不適(建議pH6.5-7.5)??蓢L試降低抗體濃度(1-5μg抗體/10μg R-PE),,或更換為含0.1% BSA的PBS緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)。  

Q8:D5-000的摩爾消光系數(shù)是多少,?  

A:約1.9×10? M?1cm?1(488nm激發(fā)),,具體數(shù)值以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。  

Q9:是否支持定制化修飾(如偶聯(lián)其他分子),?  

A:目前主要提供標(biāo)準(zhǔn)型R-PE,,定制化服務(wù)需聯(lián)系商務(wù)團(tuán)隊評估可行性(如修飾位點(diǎn)是否影響熒光特性)。  

Q10:新手第一次使用,,需要注意哪些操作細(xì)節(jié)?  

A:建議先做小劑量預(yù)實(shí)驗(yàn):取1μg R-PE與1μg抗體混合,,4℃避光孵育15分鐘,,用流式細(xì)胞儀檢測陽性/陰性對照,確認(rèn)熒光信號強(qiáng)度和背景水平后再批量使用,。  


更多產(chǎn)品信息,,請聯(lián)系中國區(qū)域代理商:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

如果您對任意產(chǎn)品或其他品牌感興趣,可通過“在線留言”功能留下您的需求

(注:本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,,具體以品牌信息文檔為準(zhǔn),。)


?Columbia Biosciences的熱賣產(chǎn)品

貨號

品名

規(guī)格

品牌

D11-000-10

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP)

10mg

Columbia Biosciences

D27-000-100

SureLight PerCP Cyanine 5.5

100mg

Columbia Biosciences

D27-000-10

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 10mg

10mg

Columbia Biosciences

D3-1714-1mg

Mouse Anti-C-MYC IgG:SureLight™ APC, 1mg

1mg

Columbia Biosciences

D3-000-10

SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 10mg

10mg

Columbia Biosciences

AD-EU-ITC-100-1kit

SureLight™ Europium Amine-Reactive Labeling Kit

1kit

Columbia Biosciences

D5/D42-000-10mg

SureLight™ R-Phycoerythrin

10mg

Columbia Biosciences

D11-010

Activated SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP), 1mg

1mg

Columbia Biosciences

D3-010-5

Activated SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 5mg

5mg

Columbia Biosciences

D27-000-5

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 5mg

5mg

Columbia Biosciences

D11-1834

Rabbit Anti-V5 IgG conjugated to PerCP

100ug

Columbia Biosciences

D17-1310-50ug

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024 – 50ug

50ug

Columbia Biosciences

D3-2212

Streptavidin: SureLight™ APC, 1mg

1mg

Columbia Biosciences

D3-1718-100

Mouse anti-DYKDDDDK IgG: SureLight™ APC;100ug

100ug

Columbia Biosciences

D11-000-500

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP) – 500mg

500mg

Columbia Biosciences

D5-000-500mg

SureLight® R-Phycoerythrin

500mg

Columbia Biosciences

D27-000-50

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5

50mg

Columbia Biosciences

D16-000-10

SureLight PE-777 – 10mg

10mg

Columbia Biosciences

D17-1310-1mg

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024

1mg

Columbia Biosciences








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