豬瘟病毒間接ELISA抗體試劑盒

【獸用名稱】

通 用 名  豬瘟病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒使用說明

商 品 名  無

英 文 名  Indirect ELISA Kit For Detection of Antibodies to Classical Swine Fever Virus  

漢語拼音  Zhuwenbingdu Jianjie ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要組分與含量】

【作用與用途】  用于檢測豬瘟病毒抗體,。

【注意事項(xiàng)】

（1）實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒取出置25℃±3回溫,，至少30分鐘,，實(shí)驗(yàn)完成后置2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽性對(duì)照,、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物,，屬正常現(xiàn)象,。

（3）請(qǐng)?jiān)谠噭┖幸?guī)定的有效期內(nèi)使用,；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi),，置2～8℃存放,。

（5）避免底物液暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑,。

（6）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋,，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

（7）嚴(yán)格按照操作程序,，仔細(xì)的吸液,、計(jì)時(shí)，充分洗滌,，對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常必要的,。

（8）使用樣品稀釋板將所有待檢血清稀釋好，再進(jìn)行檢測,。

【用法與判定】  

1  用法

1.1  樣品準(zhǔn)備  取動(dòng)物全血,，4000r/min離心10分鐘，收集上清,?；虿杉海毯笞匀晃龀鲅?。血清清亮,，無溶血。

1.2  樣品稀釋  將待檢血清樣品在樣品稀釋板中按1:40的比例稀釋（例如：在樣品稀釋板中先加入195μl樣品稀釋液,，加5μl待檢血清,。不同的樣品要注意換吸頭。樣品在稀釋過程中要充分混勻,。陰性,、陽性對(duì)照不稀釋,，直接使用。

1.3  洗滌液配制 20倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（20~25℃）,，然后用蒸餾水或純水作10倍稀釋，混勻（例如：10ml的濃縮洗滌液加上90ml純水）,。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板（根據(jù)樣本多少,，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的樣本100μl,；另外設(shè)陽性對(duì)照,、陰性對(duì)照各2孔，100μl/孔,。置37℃孵育30分鐘,。

1.4.2  棄去板中液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,，棄掉孔中洗滌液,，重復(fù)洗滌5次，拍干,。

1.4.3  每孔加入100μl酶結(jié)合物,，輕微振蕩混勻。置37℃孵育30分鐘,。

1.4.4  棄去板中液體,，洗滌5次，方法同1.4.2,。

1.4.5  每孔加底物顯色液100µl,，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µl,。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定并記錄各孔在450nm波長處的吸光度（OD）值（測定前輕輕振勻,，勿溢出）。

2  判定

2.1  成立條件  在酶標(biāo)儀上測各孔的OD_450nm值,。試驗(yàn)成立的條件是：陰性對(duì)照孔平均OD450nm值應(yīng)＜0.5,，陽性對(duì)照孔平均OD_450nm值應(yīng)＞0.5。

2.2  判定標(biāo)準(zhǔn)  

    S為樣品孔OD_450nm值,，P為陽性對(duì)照孔平均OD_450nm值,，計(jì)算樣品S/P值。

若S/P值≥0.2時(shí)判為陽性,；若S/P值＜0.2時(shí)判為陰性,。

【規(guī)格】  96孔/盒或192孔/盒或480孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為12個(gè)月,。

 僅供科研使用