實(shí)驗(yàn)室切向流過(guò)濾系統(tǒng)的作用及如何選擇濾膜包
洛科/Rocker Tanfil100 TFF切向流過(guò)濾系統(tǒng)
選擇切向流過(guò)濾(TFF)系統(tǒng)的濾膜包需綜合考量分離目標(biāo),、樣品特性、工藝規(guī)模及設(shè)備兼容性,。以下是關(guān)鍵選配要點(diǎn):
一、根據(jù)分離目標(biāo)選擇膜孔徑與截留分子量(MWCO)
目標(biāo)分子定位?
截留目標(biāo)物?(如濃縮蛋白質(zhì)):選擇MWCO為 ?目標(biāo)分子量的1/3~1/5?(例如目標(biāo)蛋白100kDa,選30-50kDa膜包)?,。
透過(guò)目標(biāo)物?(如去除小分子雜質(zhì)):選MWCO為 ?目標(biāo)分子量的5-10倍?(例如收集10kDa多肽,,選50-100kDa膜包)?,。
分離不同分子?:需確保分子量差異 ?≥10倍? 才能有效分離?。
常見(jiàn)應(yīng)用場(chǎng)景對(duì)應(yīng)膜孔徑?
細(xì)胞采集/澄清:?0.1-0.65μm微濾膜?(去除細(xì)菌,、細(xì)胞碎片)?,。
蛋白質(zhì)濃縮:?10-100kDa超濾膜?(如單抗,、酶)?。
病毒/外泌體純化:?100-1000kDa超濾膜?(如腺病毒,、外泌體截留)?,。
二,、膜材質(zhì)選擇:兼容性與吸附性
不同材質(zhì)影響回收率、耐化學(xué)性及成本:
材質(zhì)類型? ? 特點(diǎn)? ? 適用場(chǎng)景?
聚醚砜(PES)? 高化學(xué)耐受性(耐酸堿,、乙醇),,但蛋白吸附較強(qiáng) 常規(guī)蛋白,、多糖濃縮?
再生纖維素(RC)? 低蛋白吸附,適合敏感樣品,,但機(jī)械強(qiáng)度較低 抗體,、易失活蛋白?
改性聚醚砜(如Omega膜)? 低吸附、高回收率,,可重復(fù)使用 高價(jià)值生物制品(如疫苗,、治療性蛋白)?
三醋酸纖維素(CTA)? 親水性強(qiáng),,適合水相樣品 核酸、小分子脫鹽?
?提示?:若樣品易吸附,,優(yōu)先選RC或表面改性膜(如Hydrosart®)?,。
三、膜包規(guī)格與系統(tǒng)匹配
有效面積與處理體積?
實(shí)驗(yàn)室級(jí):選?cm2膜包?(如Minimate系統(tǒng),,可并聯(lián)個(gè))]。
中試級(jí):選?0.09-0.46m2膜包?(如Centramate系統(tǒng),可并聯(lián)個(gè))],。
通道結(jié)構(gòu)與死體積?
高粘度樣品:選?寬流道膜包?(減少堵塞),。
小體積樣品:測(cè)量系統(tǒng)?死體積?(管路+膜包內(nèi)部),避免樣品損失5],。
四、工藝參數(shù)與維護(hù)要求
. ?操作條件適配性?
高剪切敏感樣品:降低切向流速,,避免分子失活],。
高固含量樣品:選用?開(kāi)放式流道設(shè)計(jì)?,減少濃差極化],。
清洗與壽命?
常規(guī)清洗:?0.1-1M NaOH?(水解蛋白)或 ?.M磷酸?(除無(wú)機(jī)鹽)5],。
重復(fù)利用:改性PES膜(如Pall Omega膜)可耐受多次CIP(原位清洗)5],。
五,、選型流程總結(jié)
明確分離目標(biāo)?→ 2. ?計(jì)算MWCO/孔徑?→ . ?篩選材質(zhì)?→ . ?匹配系統(tǒng)規(guī)模?→ 5. ?驗(yàn)證清洗兼容性?,。
???注意事項(xiàng)?:
膜包與設(shè)備需?同品牌兼容?(如Pall Minimate僅兼容Omega膜)?;
shou次使用前需?預(yù)處理膜包?(純水沖洗,,排除保存液)?。
通過(guò)綜合以上維度,,可優(yōu)化分離效率并降低成本,。實(shí)際選型建議結(jié)合預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證膜通量及回收率?。
廈門洛肯儀器有限公司
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