標(biāo)題: Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹
在生命科學(xué)研究,,特別是基因功能研究,、蛋白表達(dá)和基因治療等領(lǐng)域,,將外源核酸(DNA,、RNA)高效,、安全地導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)部是至關(guān)重要的實驗步驟,,這一過程稱為轉(zhuǎn)染。Polysciences公司作為國際z名的生命科學(xué)試劑與材料供應(yīng)商,,憑借其深厚的技術(shù)積累,,開發(fā)了一系列性能z越的轉(zhuǎn)染試劑,為全球科研工作者提供了高效,、可靠的工具,。以下是關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的深度解析
一、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑核心優(yōu)勢
1. 廣譜高效性
- 細(xì)胞兼容性極廣:成功驗證于HEK293,、CHO,、HeLa等常見細(xì)胞系,及原代細(xì)胞,、干細(xì)胞,、懸浮細(xì)胞(如Jurkat)等難轉(zhuǎn)染類型。
- 多核酸適配:適用于質(zhì)粒DNA,、siRNA,、mRNA及CRISPR-Cas9組件,尤其擅長大質(zhì)粒(>10kb) 轉(zhuǎn)染,。
2. 成本效益比突出
- 價格僅為商品化試劑(如jetPEI®)的1/5-1/3,,1g裝售價約$100,可配制500mL以上工作液,,單次轉(zhuǎn)染成本低至$0.1,。
3. 定制化靈活性
- 提供線性PEI(25 kDa) 與 支鏈PEI(25/40/60 kDa) 多分子量選擇:
- 25 kDa線性PEI:毒性低,適合原代細(xì)胞
- 40 kDa支鏈PEI:轉(zhuǎn)染效率高,,適用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系
二,、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑性能實測對比
指標(biāo) | Polysciences PEI | 進(jìn)口競品(如jetPEI®) |
HEK293效率 | 85-95% | 90-98% |
CHO細(xì)胞存活率 | >80% | >85% |
懸浮細(xì)胞效率 | 60-75% (Jurkat) | 65-80% |
批間穩(wěn)定性 | 需自行質(zhì)檢 | 預(yù)質(zhì)檢認(rèn)證 |
三、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑操作關(guān)鍵點
1. 工作液配制
- 將PEI粉末溶解于無菌pH 4.5鹽酸溶液,,煮沸10分鐘,調(diào)pH至7.0后過濾除菌(避免直接使用PBS導(dǎo)致沉淀),。
2. 轉(zhuǎn)染復(fù)合物比例
- 黃金比例范圍:
- DNA : PEI = 1μg : 2-4μg(貼壁細(xì)胞)
- DNA : PEI = 1μg : 3-6μg(懸浮/難轉(zhuǎn)細(xì)胞)
- 孵育時間:15-30分鐘(室溫)
3. 毒性控制技巧
- 轉(zhuǎn)染后6小時更換培養(yǎng)基,,降低長期毒性
- 難轉(zhuǎn)染細(xì)胞添加0.1mM丁酸鈉提升表達(dá)
四、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑適用場景推薦
- 強(qiáng)烈推薦:
- 大規(guī)模生產(chǎn)(病毒包裝,、蛋白表達(dá))
- 經(jīng)費有限的實驗室高頻次轉(zhuǎn)染
- 大片段DNA(>15kb)遞送
- 謹(jǐn)慎使用:
- 對細(xì)胞毒性極度敏感的神經(jīng)元
- 無血清培養(yǎng)體系(需優(yōu)化復(fù)合物緩沖液)
五,、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑缺陷與應(yīng)對
1. 批次差異風(fēng)險
- 每批PEI需用報告基因質(zhì)粒(如pEGFP) 預(yù)實驗確定最佳比例。
2. 沉淀問題
- 復(fù)合物出現(xiàn)絮狀沉淀時,,加入5-10%葡萄糖改善分散性,。
3. 支原體污染
- 購買后立即分裝凍存,使用前過濾(0.22μm),。
> 結(jié)論:Polysciences PEI是預(yù)算敏感型實驗室的s選,。其廣譜性,、高載量能力和極低單價優(yōu)勢顯著,但需付出優(yōu)化成本,。掌握配制與比例控制要點后,,可穩(wěn)定獲得媲美進(jìn)口試劑的效果,特別推薦用于病毒生產(chǎn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染項目,。
注:建議s選貨號24765-1(線性PEI 25kDa),,適用性廣,毒性可控,。
polysciences轉(zhuǎn)染試劑24765-1,、24765-100、23966-1,、23966-100代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,,歡迎咨詢選購。
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