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辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗人IgG(H+L)二抗:親和純化,,高靈敏度

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2025年06月04日 16:13  

HRPHorseradish Peroxidase,辣根過氧化物酶)是一種分子量達(dá)44000的糖蛋白,,由無色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結(jié)合而成,通常來源于辣根植物中,,是臨床檢驗(yàn)試劑中的常用酶,。辣根過氧化物酶(Horseradish PeroxidaseHRP)比活性高,,穩(wěn)定,,分子量小,純酶容易制備,,所以常用,。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋 白,,糖含量18%。由于其易于提取,、價格相對低廉,,同時性質(zhì)穩(wěn)定,耐熱及有機(jī)溶劑的作用,,與抗原或抗體偶聯(lián)后,,活性很少受損失,因此是迄今為止在免疫學(xué)中應(yīng)用最為廣泛的一種標(biāo)記用酶,。HRP的催化底物包括色原底物,、化學(xué)發(fā)光底物等,其中常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD),、2,,2-吖嗪-3-乙酰苯 基噻唑磺酸-6)(ABTS)、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和4-氨基安替比林:苯酚耦聯(lián)底物對等,;而化學(xué)發(fā)光底物則包括Luminol/增強(qiáng)劑等系統(tǒng),。

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艾美捷辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗人IgG(H+L)二抗

貨號:109-035-003

物理狀態(tài):凍干固體

純度:抗體通過免疫親和層析從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化,。

緩沖液:0.01M 磷酸鈉,,0.25M 氯化鈉,,pH 7.6

穩(wěn)定劑:15 mg/ml 牛血清白蛋白(無IgG,無蛋白酶)

防腐劑:無(警告:使用疊d化鈉作為防腐劑將顯著抑制辣根過氧化物酶的酶活性,。)

免疫原:人IgG

來源宿主:山羊

 

建議的工作濃度或稀釋范圍:

免疫組織化學(xué)/細(xì)胞化學(xué):1:500 - 1:5,000

使用比色底物的ELISAWestern blot1:5,000 - 1:100,000

使用ECL底物的Western blot1:10,000 - 1:200,000

 

稀釋因子以范圍形式呈現(xiàn),,因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),例如抗原密度,、通透性等,。實(shí)際使用的稀釋度必須通過實(shí)驗(yàn)確定。

偶聯(lián)物:辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP

辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物是通過改良的NakaneKawaoi方法制備的(《組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志》1974年,,第22卷,,第1084頁)。過氧化物酶偶聯(lián)物常用于免疫組織化學(xué),、Western blotELISA,。可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或放大含有HRP的試劑信號的抗辣根過氧化物酶及其偶聯(lián)物,。對于哺乳動物細(xì)胞的免疫染色,,使用抗辣根過氧化物酶的一個優(yōu)勢是背景較低,因?yàn)樵摽贵w不會識別這些細(xì)胞中存在的內(nèi)源性類過氧化物酶,。

反應(yīng)性:該山羊抗人二抗與人IgG分子有特異性反應(yīng),,與其它人免疫球蛋白(包括IgMIgE,、IgD,、IgA等)的輕鏈有交叉反應(yīng)。該二抗與血清內(nèi)非免疫球蛋白無交叉反應(yīng),,但可能與其它種屬的免疫球蛋白有交叉反應(yīng),。

儲存與復(fù)溶:將凍干固體儲存在2-8°C。按照產(chǎn)品說明書指示的體積用去離子水復(fù)溶,,如果溶液不澄清,,可以離心。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作液,。產(chǎn)品作為未稀釋的液體在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周,。

長期儲存:復(fù)溶后,分裝并置于-70°C或更低溫度下冷凍保存,。避免反復(fù)凍融,。或者,,加入等體積的甘油(ACS級或更優(yōu)),,使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存,。

有效期:從復(fù)溶日期起一年,。如果測試結(jié)果符合預(yù)期用途,,有效期可以延長。  


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