PCR溫度校驗儀是確保PCR儀溫度控制精度的關鍵設備,其校準需遵循嚴格流程,。以下是校準的核心步驟及注意事項:
一,、校準前準備
環(huán)境控制
確保校準環(huán)境溫度為15-30℃,濕度≤75%RH,,避免環(huán)境波動影響結(jié)果,。
設備需預熱30分鐘,待內(nèi)部溫度穩(wěn)定后再進行校準,。
標準器選擇
使用高精度溫度標準器(如二等標準鉑電阻溫度計或黑體輻射源),,校準不確定度需≤校準儀允許誤差的1/3。
示例:若校準儀允許誤差為±0.1℃,,則標準器不確定度需≤0.03℃,。
校準點設置
覆蓋PCR儀全溫區(qū)(如35-100℃),關鍵校準點包括:
變性溫度(94-95℃),、退火溫度(50-65℃),、延伸溫度(72℃)。
邊緣溫度點(如35℃,、100℃)用于驗證線性度,。
二、校準步驟
零點校準
將溫度傳感器置于冰水混合物(0℃)中,,調(diào)整設備顯示值為0.000℃,,誤差需≤±0.05℃。
多點校準
升溫過程:從35℃開始,,每5℃遞增至100℃,,記錄實際溫度與顯示值的偏差。
降溫過程:從100℃降至35℃,,重復上述記錄,。
示例數(shù)據(jù):

動態(tài)響應測試均勻性測試
在加熱模塊上放置多個溫度傳感器(如96孔板對應位置),測量不同位置的溫差,。
示例:若最大溫差超過±0.5℃,,需調(diào)整加熱模塊或更換傳感器。
記錄設備從35℃升至95℃的升溫速率(應≥1.5℃/s),,以及從95℃降至35℃的降溫速率(應≥1.5℃/s),。
超調(diào)量需≤1℃,穩(wěn)定時間≤10秒,。
三,、校準后處理
結(jié)果判定
溫度偏差≤±0.1℃、均勻性≤±0.5℃,、動態(tài)響應符合要求,,則校準合格,。
若不合格,需排查傳感器,、加熱模塊或控制電路故障,。
證書與記錄
生成校準證書,記錄校準日期,、環(huán)境條件,、校準點數(shù)據(jù)及結(jié)論。
保存原始記錄至少5年,,以備追溯,。
四、注意事項
傳感器保護:避免傳感器接觸腐蝕性液體或機械損傷,。
定期核查:每6個月進行一次期間核查,,使用核查標準(如恒溫油槽)驗證穩(wěn)定性。
法規(guī)遵循:校準需符合ISO 17025,、CNAS-CL01等實驗室認可要求,。
通過以上步驟,可確保PCR溫度校驗儀的準確性,,從而保障PCR儀溫度控制的可靠性,。
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