嘔吐毒素也稱為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),,是由串珠鐮刀菌、輪狀鐮刀菌以及多育鐮刀菌等產(chǎn)生的真菌毒素,,大多存在于糧谷,、飼料及其制品中。中毒后影響消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng),,主要表現(xiàn)為嘔吐,、頭痛、頭暈,、腹痛,、腹瀉等癥狀。
測定的基礎是抗原-抗體反應,。微孔板上包被有抗抗體,。加入嘔吐毒素(DON)標準品或樣品、酶標抗原和抗體后,,游離的嘔吐毒素與酶標抗原競爭結(jié)合抗體,,抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合,沒有結(jié)合的標準品,、酶標抗原及抗體被洗去,,加入TMB底物顯藍色,加入終止液后顏色由藍變黃,,用酶標儀在450nm處檢測,,吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負相關,與標準曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量,。
注意事項:
室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會導致數(shù)值偏低,。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,,重復性不好的現(xiàn)象,。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。
標準物質(zhì)和顯色液對光敏感,,避免直接暴露在光線下,。
混合要均勻,洗板要*(包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻)。
終止液為強酸性物質(zhì),,避免接觸皮膚,。
不要使用過了有效期的試劑盒,也不要混合使用不同批次的試劑盒,,這樣會引起測定結(jié)果不準確,。
試劑盒的儲存條件是2-8℃,切勿冷凍,。
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