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植物ELISA檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標(biāo)板上,，實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會與包被抗體結(jié)合,，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,?？贵w與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,，游離的成分被洗去,。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,，加終止液后變成黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，抗原濃度與OD450值之間呈正比,，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中指標(biāo)的濃度,。
生物樣品中的通常以無活性的形式存在，在檢測指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理,。
活化方法如下：
血清,、血漿：280μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40μL樣品,，混勻,，加入40μL活化試劑1，室溫孵育10分鐘,。再加入40μL活化試劑2,，混勻后立即檢測。
注意：樣品被稀釋了10倍,！
細(xì)胞培養(yǎng)上清：20μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100μL樣品,，混勻，加入40μL活化試劑1,，室溫孵育10分鐘,。再加入40μL活化試劑2，混勻后立即檢測,。
注意：樣品被稀釋了2倍,！
組織勻漿：1960μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40μL樣品，混勻后檢測,。
注意：樣品被稀釋了50倍,！
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