利用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）進行檢測的樣本類型包括常見的血液（血清、血漿）,，組織勻漿,、細胞裂解液,、細胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織,、尿液,、糞便,、肺泡灌洗液,、唾液,、腦脊液、胸腹水等,，這些樣本收集的時間,、處理方法和保存都會影響到ELISA實驗的結(jié)果。下面整理了常見細胞樣本處理方法供大家參考,。

一,、如何選擇細胞樣本收集方式：

細胞樣本根據(jù)目的物所在部位可選擇細胞裂解液或細胞培養(yǎng)上清作為樣本。

- 目的物是分泌型,，主要在胞外,，即可選擇細胞培養(yǎng)上清作為樣本，細胞培養(yǎng)上清處理方法相對簡單,，取細胞培養(yǎng)上清,，1000 × g離心 20 分鐘，取上清即可檢測,。

- 目的物主要存在于胞內(nèi),，則建議選擇細胞裂解液作為樣本類型。

需要注意的是： 因該類樣本干擾因素較多,，如細胞狀態(tài),、細胞數(shù)量、pH,、培養(yǎng)基鹽離子濃度,、采樣時間等，所以可能存在檢測不到的情況,。

二,、細胞裂解液收集方法：

1.貼壁細胞需要先用胰酶消化，離心收集細胞（懸浮細胞可直接離心收集）,；

2.將收集到的細胞用預冷的 PBS 洗3次,；

3.物理方法裂解細胞（可先超聲破碎細胞，再反復凍融）：

- 超聲破碎：取適量PBS 重懸細胞,，用一定功率的超聲波處理細胞懸液,，使細胞急劇震蕩破裂；

- 反復凍融：將待破碎的細胞在-20℃以下冰凍,，室溫融解,，反復3次,，使細胞溶脹破碎,；

4.將樣本于2-8 度 1500 × g 離心 10 分鐘,，收集上清備用。

注: 一般情況下,，物理方法如反復凍融,，勻漿等方法會比化學方法好，因為化學方法會引入酸或堿,，可能會對ELISA實驗產(chǎn)生影響,。利用化學的細胞裂解液裂解細胞，如果去污劑成分會干擾抗原抗體反應影響檢測效果,，推薦利用透析和超濾的方法去除去污劑成分,。

三、樣本保存：

1.處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程,，由于蛋白容易變性,，降解，故該過程應盡量溫和,。

2.樣本處理之后的儲存也非常重要,，尤其注意不要反復凍融，樣本處理之后可按需分裝密封保存,， 4 度保存應小于 1 周,，-20 度不應超過 1 個月，-80度不應超過2個月,。

3.在檢測前,，凍存樣本應緩慢均衡恢復至室溫，不應加熱使之融解,。