HGC-27細胞是一種來源于人胃癌患者轉移性淋巴結的低分化胃癌細胞系,，具有較強的侵襲性和增殖能力，常用于研究胃癌的分子機制,、藥物篩選以及侵襲與轉移特性分析,。它在體外呈上皮樣貼壁生長,，呈多角形或短梭形,，以單層形式生長。能夠在免疫缺陷小鼠中形成移植瘤,，是胃癌相關研究的重要模型,。

一、實驗準備（關鍵物料清單）

? 細胞來源：建議從ATCC/中科院細胞庫獲?。ㄅ柨伤菰矗?br style="--tw-border-spacing-x:0; --tw-border-spacing-y:0; --tw-translate-x:0; --tw-translate-y:0; --tw-rotate:0; --tw-skew-x:0; --tw-skew-y:0; --tw-scale-x:1; --tw-scale-y:1; --tw-pan-x: ; --tw-pan-y: ; --tw-pinch-zoom: ; --tw-scroll-snap-strictness:proximity; --tw-gradient-from-position: ; --tw-gradient-via-position: ; --tw-gradient-to-position: ; --tw-ordinal: ; --tw-slashed-zero: ; --tw-numeric-figure: ; --tw-numeric-spacing: ; --tw-numeric-fraction: ; --tw-ring-inset: ; --tw-ring-offset-width:0px; --tw-ring-offset-color:#fff; --tw-ring-color:#3b82f680; --tw-ring-offset-shadow:0 0 #0000; --tw-ring-shadow:0 0 #0000; --tw-shadow:0 0 #0000; --tw-shadow-colored:0 0 #0000; --tw-blur: ; --tw-brightness: ; --tw-contrast: ; --tw-grayscale: ; --tw-hue-rotate: ; --tw-invert: ; --tw-saturate: ; --tw-sepia: ; --tw-drop-shadow: ; --tw-backdrop-blur: ; --tw-backdrop-brightness: ; --tw-backdrop-contrast: ; --tw-backdrop-grayscale: ; --tw-backdrop-hue-rotate: ; --tw-backdrop-invert: ; --tw-backdrop-opacity: ; --tw-backdrop-saturate: ; --tw-backdrop-sepia: ; box-sizing: inherit;"/>? 培養(yǎng)基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%雙抗（Gibco品牌優(yōu)選）
? 儀器：37℃恒溫CO?培養(yǎng)箱（CO?濃度5%）,、生物安全柜（潔凈度100級）

二、詳細培養(yǎng)步驟

1. 復蘇操作

快速解凍37℃水浴≤2分鐘離心去DMSO1000rpm×5min重懸接種初始密度2×10? cells/cm2

?? 防凍傷要點：解凍后立即轉移至預溫培養(yǎng)基

2. 傳代方法

• 消化控制：0.25%胰酶（含EDTA）作用2-3分鐘（鏡下觀察細胞變圓）

• 終止技巧：加入含血清培養(yǎng)基（體積≥3倍消化液）

• 分瓶比例：1:3至1:4（24-48小時可達80%融合度）

3. 凍存方案

• 凍存液配方：90% FBS + 10% DMSO（現(xiàn)用現(xiàn)配）

• 程序降溫：4℃ 30min → -20℃ 2h → 液氮長期保存

三,、培養(yǎng)問題排查（附解決方案）

?? 注意事項（提升實驗成功率）

• 狀態(tài)監(jiān)控：每日觀察細胞形態(tài)（貼壁率＜50%需排查）

• 傳代周期：不超過30代（建議定期STR鑒定）

• 污染預防：操作前紫外滅菌30min,，試劑瓶酒精噴淋

  
  

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