在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,，胎牛血清作為一種極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，被廣泛用于提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分,。然而,，在實(shí)際操作中，研究者們有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)胎牛血清變得渾濁,，這不僅影響了細(xì)胞的正常培養(yǎng),，還可能引發(fā)對(duì)血清品質(zhì)的擔(dān)憂。

胎牛血清的重要性

胎牛血清是從未接觸過外界的胎牛血液中提取的天然成分,，因其含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、激素、維生素,、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，成為細(xì)胞培養(yǎng)中的營(yíng)養(yǎng)添加劑。與新生牛血清,、小牛血清和成牛血清相比,，胎牛血清的抗體含量較低，降低了與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),，是理想的細(xì)胞生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,。

胎牛血清渾濁的原因

胎牛血清變得渾濁，可能是由于以下幾種原因造成的：

1. 纖維蛋白沉淀：纖維蛋白是參與凝血過程的蛋白之一,，在血清收集和快速處理過程中,，部分纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）可能仍處于溶解狀態(tài),。然而，當(dāng)血清經(jīng)過最后的過濾分裝后,，這些纖維蛋白原會(huì)在瓶中凝結(jié)，形成肉眼可見的大塊沉淀（可達(dá)1-2mm）,，從而導(dǎo)致血清渾濁,。

2. 磷酸鈣沉淀：磷酸鈣是另一種常見的沉淀物，它會(huì)使血清呈現(xiàn)輕微的渾濁狀態(tài),。尤其在37℃的培養(yǎng)環(huán)境中,，磷酸鈣沉淀的數(shù)量會(huì)增加。在顯微鏡下觀察,，這些沉淀物像小黑點(diǎn)一樣,，由于布朗運(yùn)動(dòng)而呈現(xiàn)活動(dòng)狀態(tài)，常被誤認(rèn)為是微生物污染,。

3. 其他成分沉淀：除了纖維蛋白和磷酸鈣外,，血清中的膽固醇、脂肪酸酯,、一些蛋白質(zhì)以及脂蛋白等也可能因各種原因發(fā)生變性或沉淀,，導(dǎo)致血清渾濁。這些成分在血清中的穩(wěn)定性受到多種因素的影響,，如溫度變化,、反復(fù)凍融等。

4. 溫度變化：血清在解凍過程中,，如果溫差驟變,，容易造成蛋白質(zhì)等成分的變性或沉淀。例如,，水浴融化可能會(huì)導(dǎo)致沉淀增多,。此外，血清解凍時(shí)冰塊和蛋白融化速度不一致,，也可能導(dǎo)致局部蛋白濃度過高而產(chǎn)生沉淀,。

5. 反復(fù)凍融：解凍后的血清如果再次冷凍，反復(fù)多次凍融會(huì)影響血清中的蛋白質(zhì)和生長(zhǎng)因子的穩(wěn)定性,，導(dǎo)致沉淀增多,，進(jìn)而使血清變得渾濁。

對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響及應(yīng)對(duì)措施

雖然胎牛血清的渾濁現(xiàn)象不會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生直接影響（大多數(shù)研究者及血清生產(chǎn)商已證明這一點(diǎn)）,，但過多的沉淀物可能會(huì)影響血清的過濾和使用效果,。因此，在實(shí)驗(yàn)室中,，一般不推薦對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清進(jìn)行再次過濾處理,。如果血清中出現(xiàn)大量沉淀物,，可以通過離心處理去除沉淀物，將上清液直接加入到培養(yǎng)基中一起過濾使用,。

為了避免胎牛血清渾濁現(xiàn)象的發(fā)生,，建議采取以下措施：

• 正確的解凍步驟：在解凍血清時(shí)，應(yīng)遵循正確的解凍步驟,，并確保溶解過程中每隔一段時(shí)間均勻而緩慢地?fù)u動(dòng)血清,，以減少沉淀物的產(chǎn)生。

• 避免反復(fù)凍融：盡量減少血清的反復(fù)凍融次數(shù),，以保持血清中蛋白質(zhì)和生長(zhǎng)因子的穩(wěn)定性,。

• 適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件：長(zhǎng)期儲(chǔ)存時(shí)，應(yīng)將血清置于2-8℃的冷藏環(huán)境中,，并避免在室溫下放置時(shí)間過長(zhǎng),。

結(jié)論

胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中起著重要的作用，但其渾濁現(xiàn)象卻時(shí)有發(fā)生,。通過深入了解胎牛血清渾濁的原因,，并采取有效的應(yīng)對(duì)措施，我們可以更好地利用這一營(yíng)養(yǎng)添加劑,，為細(xì)胞提供一個(gè)穩(wěn)定,、適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。同時(shí),，這也提醒我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)過程中要時(shí)刻關(guān)注細(xì)節(jié),，確保每一步操作的準(zhǔn)確性和科學(xué)性。