QKine重組人角質(zhì)細胞生長因子(FGF-7)蛋白(Qk046)的應用和活性檢測分析
角質(zhì)細胞生長因子(KGF),,也稱為成纖維細胞生長因子-7(FGF-7),是大FGF家族的一部分,,與FGF-3、FGF-10和FGF-22一起,,是FGF-7亞家族的成員。該亞家族僅由間充質(zhì)分泌,,并特異性激活存在于上覆上皮中的FGFR1(FGFR1b)和FGFR2(FGFR2b)的“b”亞型[1],,這些受體的KGF通過FGFR2的IIIb剪接形式起作用。KGF是腎臟,、胸腺和海馬發(fā)育所必需的[2],。KGF在傷口愈合中也起著重要作用[3],這一作用在生物工程皮膚研究中得到了體現(xiàn)[3],。KGF蛋白已被用于產(chǎn)生許多類器官,,包括肺、乳腺,、肝臟和膀胱[2],。
Qkine人FGF-7/KGF是一種高純度、生物活性19kDa的蛋白質(zhì),,不含動物來源(AOF)和載體蛋白(CF),。
艾美捷QKine重組人角質(zhì)細胞生長因子(FGF-7)蛋白(Qk046):
摘要:高純度FGF-7/KGF蛋白(UniProt編號:P21781)
純度 >98%,通過SDS-PAGE定量密度分析測定
分子量:19 kDa
表達系統(tǒng):大腸桿菌(E. coli)
無動物源成分(AOF)且無載體蛋白
在英國劍橋的實驗室生產(chǎn)
凍干自PBS緩沖液
復溶方法:在水中復溶至>100 µg/ml,,制備單次使用分裝,,如需可添加載體蛋白,然后在-20℃或-80℃冷凍保存
推薦應用:
氣道,、乳腺,、肝細胞和泌尿道類器官培養(yǎng)
進一步質(zhì)量檢測:
質(zhì)譜分析:單一物種,具有預期質(zhì)量
內(nèi)毒素:<0.005 EU/µg蛋白(低于檢測水平)
從原瓶回收率:>95%
FGF-7(KGF)活性測定
使用Promega血清反應元件熒光素酶報告基因檢測(*)在轉(zhuǎn)染的MCF-7細胞中測定FGF-7(KGF)活性,。細胞用KGF的系列稀釋液處理4小時(每組三個重復),。通過測量螢火蟲熒光素酶活性并歸一化到對照組的海腎熒光素酶活性來評估。EC?? = 92 pM(1.75 ng/mL),。數(shù)據(jù)來自Qk046批次#104314,。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340
SDS-PAGE分析
在非還原(NR)條件下,KGF蛋白以19 kDa單體和38 kDa二聚體形式遷移,;在還原(R)條件下,,遷移為19 kDa。未見其他污染蛋白條帶,。3 µg純化重組蛋白通過15%(w/v)SDS-PAGE在還原(+β-巰基乙醇,,R)和非還原(NR)條件下分離,,并用考馬斯亮藍R250染色。數(shù)據(jù)來自Qk046批次#104314,。
文獻參考:
Generation of human iPSC-derived pancreatic organoids to study pancreas development and disease
bioRxiv preprint on 25 October 2024 by Darrigrand, J. et al.
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