1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑、蒸餾水,、去離子水,、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標本和加酶結(jié)合物后,??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的*一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中,。儀器準備為酶標儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定,。
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