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免疫檢測法的精確性表現(xiàn)為單次實驗孔間(批內(nèi))的重復性和多次實驗之間(批間)的重復性。CV值高則表明精確度低,,通常由以下兩個原因造成:移液技術和洗滌技術,。
一、移液技術
1. 移液時,,槍頭應對準孔,,避免接觸孔壁及底部。
2. 移液后輕輕晃動混勻試劑,。
3. 如果您的樣品具有黏性,,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出,。
4. 移液不充分或移液體積不均,,說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正,。
5. 加樣時,,不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭,避免交叉污染,。
6. 確保使用合適的槍頭,。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。
二、洗滌技術
1. 如果使用自動洗板機或多通道移液器,,請確保進出口能正常運作,。
2. 最后一次洗滌后,翻轉(zhuǎn)酶標板倒出多余的洗滌液,,并在吸水紙上拍干液體,。洗板太快或太慢都會降低精確度。不能讓孔內(nèi)液體自然風干,,需立即進行下一步操作,。
3. 按照說明書,添加足量的洗滌液至孔內(nèi),,并保證洗滌*,。
4. 由于洗滌液不是通用的,當試劑盒內(nèi)的洗滌液用完時,,請不要使用其他試劑盒中的洗滌液,。如有需要,可聯(lián)系技術支持尋求幫助,。
5. 不要減少洗滌時的浸泡時間或跳過浸泡的步驟,。
6. 按照說明書上的洗滌次數(shù)清洗,,隨意改變洗滌的次數(shù)會影響實驗的精確性,。
三、貯液瓶
為避免污染,,不同的試劑使用不同的貯液瓶,。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液、氧化劑等),,請參考說明書操作,。必要時候采取一些預防措施保護溶液。
四,、封板覆膜
使用過的封板覆膜可能含有上一步實驗殘留的試劑,,如果重復使用會造成孔板污染,從而導致精確性低,。建議每一次孵育使用新的封板覆膜,。
上海研域生物技術員提醒顧客注意事項:“切勿使用過多的檢測試劑!如果濃度過高,,ELISA試劑盒或者未正確稀釋,,則會導致高背景。也不要顯色過度,,如有必要,,優(yōu)化一下何時應加入終止液。
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