檢測范圍                                                         

5ng/L -160ng/L

使用目的

本試劑盒用于測定牛血清，血漿及相關(guān)液體樣本中流行熱病毒抗體（EFV-Ab）含量,。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中牛流行熱病毒抗體（EFV-Ab）水平,。用純化的抗原包被微孔板,，制成固相抗原,，往包被的微孔中依次加入流行熱病毒抗體（EFV-Ab），再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的流行熱病毒抗體（EFV-Ab）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中牛流行熱病毒抗體（EFV-Ab）濃度。

標(biāo)本要求 

1．標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

完整版說明書可咨詢我司業(yè)務(wù)員,。上海恒遠生物科技有限公司是國內(nèi)ELISA試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，代理銷售不同ELISA試劑盒品牌的進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒,，專業(yè)供應(yīng)科研實驗所需的培養(yǎng)基,，抗體，動物血清血漿,，標(biāo)準(zhǔn)品對照品,，化學(xué)試劑，酶聯(lián)免疫試劑盒,，白介素試劑盒,，金標(biāo)檢測試劑盒，微生物,，蛋白質(zhì),，ELISA種屬涵蓋廣,，憑借多年行業(yè)經(jīng)驗,，完善的售后服務(wù),，高質(zhì)量的產(chǎn)品,。如果您有實驗上的問題歡迎來咨詢,。