【包裝規(guī)格】
貨號:WLRE8208KIT
規(guī)格:48 份/盒
【原理概述】
本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術(shù):在常溫恒溫下,,特殊修飾的反轉(zhuǎn)錄酶利用特異性引物 DNA 和模板 RNA 合成cDNA 鏈,,反應(yīng)體系中的重組酶,、單鏈 DNA結(jié)合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA鏈為模板進行快速核酸擴增反應(yīng)。本試劑盒在 42 oC 下,,依賴核酸外切酶的作用,,加入根據(jù)模板設(shè)計的特異的分子探針,使用熒光監(jiān)測設(shè)備能實現(xiàn)對目標片段擴增過程的實時監(jiān)控,。適用于實驗室級別的 RNA 擴增以及其他檢測用途的 RNA 擴增使用,。
【產(chǎn)品特點】
本試劑盒具有靈敏度高、特異性強,、反應(yīng)時間短(僅需 20 min)等優(yōu)點,,反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡便,,易于保存,。
可適用于各種品牌的熒光定量 PCR 儀,恒溫?zé)晒鈹U增儀器等熒光檢測設(shè)備,。
【引物設(shè)計】
建議使用長度在 30-35 bp 的引物,,引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度;引物設(shè)計避免形成二級結(jié)構(gòu)而影響擴增,;擴增子長度建議在 150-500 bp,。
【熒光探針設(shè)計】
探針序列不與特異性引物識別位點重疊,長度為 46-52 nt,,序列避免回文序列,、內(nèi)部二級結(jié)構(gòu)和連續(xù)的重復(fù)堿基。探針共有四個修飾位點:距離 5’端的≈35 nt 的中部位置標記一個 dSpacer(四氫呋喃,,THF),,作為核酸外切酶的識別位點;THF 位點的上游標記一個熒光基團,,下游標記一個粹滅基團,,兩個基團的間距為2-4 nt;THF 距離3’末端≥15 nt,,并且 3’末端標記一個修飾基團,,例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer。
【試劑盒組成】
組成 | 含量 |
A buffer | 1.6 mL×1管 |
B buffer | 150 μL×1管 |
試劑 | 48份 |
使用說明書 | 1份 |
注:考慮到核酸降解問題,,RNA 系列產(chǎn)品不提供正對照模板和引物探針,。
【試劑盒儲存】
1.運輸溫度:≤20oC的恒溫環(huán)境;
2.儲存條件:儲存溫度≤-20°C(±5°C)恒溫環(huán)境,,避光保存,避免重壓,、反復(fù)凍融,;
3.產(chǎn)品有效期:14個月;
4.生產(chǎn)日期見外包裝,。
【注意事項】
1. 由于試劑盒靈敏度非常高,,在進行反應(yīng)時請注意避免核酸污染,并設(shè)置空白對照,;
2.使用時請取出實驗所需的 MIRA 反應(yīng)單元的數(shù)量,,剩余部分請置于存儲條件下。
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