NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)在EDTA抗凝血中應(yīng)用第2篇

血常規(guī)檢測(cè)中最經(jīng)常使用的就是EDTA抗凝血，它能夠用于血細(xì)胞形態(tài),、生化檢測(cè),、血型鑒定、標(biāo)志物檢測(cè),、基因篩查等。常見(jiàn)的基因篩查都涉及到核酸提取和擴(kuò)增,。檢驗(yàn)科或者實(shí)驗(yàn)室最常使用的方法就是離心柱或者磁珠提取法進(jìn)行DNA或者RNA提取,。但是以上方法有以下盲點(diǎn)：

1、離心柱提取無(wú)法自動(dòng)化,，一次提取量受限于離心機(jī)規(guī)模,，而且無(wú)法高通量操作；

2,、磁珠提取法雖然能夠高通量,，但是設(shè)備昂貴；

3,、離心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL,；

4、離心柱提取的核酸含量比較高,，而磁珠依據(jù)廠家不同得率不穩(wěn)定,；

5、前處理時(shí)間比較長(zhǎng),；

6,、離心柱的批間差異相對(duì)于磁珠更好控制；

綜上所述,，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),，在通量、效率,、自動(dòng)化上很難兩全,。鑒于此情況，我司開(kāi)發(fā)的NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)和EDTA血檢測(cè)相結(jié)合,，僅需要10-20抗凝血,，同時(shí)可以處理百份甚至千份血液。所含試劑中不包含有生物酶制劑,，例如蛋白酶K,，所以批間差異很小,?？偨Y(jié)如下：

— EDTA血量少

— 5分鐘處理

— 高通量樣本量

— 無(wú)腦操作

— 無(wú)需大型設(shè)備

操作流程

案例A 不同體積人EDTA抗凝血處理后擴(kuò)增4對(duì)引物

1,、0.1μL   2、1μL   3,、10μL   4,、20μL   5、50μL   6,、100μL   7,、200μL

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒Plus（貨號(hào)Nu-B02）處理不同體積人EDTA抗凝血,，使用2×Master TaqMix(With Dye)分別擴(kuò)增4對(duì)引物,。

案例B 人EDTA抗凝血處理后在50μL體系下擴(kuò)增

1,、1μL   2、2μL   3,、5μL   4,、10μL   5、15μL   6,、20μL   7,、23μL

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒Plus（貨號(hào)Nu-B02）處理10μL人EDTA抗凝血,。在50μL擴(kuò)增體系中,，使用1μL到23μL模版體積擴(kuò)增4對(duì)引物。