在培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的時(shí)候,,偶爾會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接種后貼壁不均勻的情況,。有的地方長得非常密集,,有的地方卻太稀疏,。雖然這對于常規(guī)培養(yǎng)并不算大問題,,但有時(shí)則可能影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,。
所以一旦遇到貼壁不勻,,建議排查原因并優(yōu)化操作方案。
本文中,,小尚將細(xì)胞貼壁不均勻總結(jié)歸納為四種情況:
1. 局部生長密集,,密集處呈不規(guī)則分布
l 原因:一般是接種時(shí)沒有混勻,,或者細(xì)胞傳代時(shí)沒有消化徹di從而形成細(xì)胞團(tuán)塊導(dǎo)致的
l 解決方案:繼續(xù)培養(yǎng)1-2天,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,,重新消化接種,,接種時(shí)注意使用十字法或8字法混勻,接種后顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞是否分散為單個(gè)細(xì)胞,。
2. 培養(yǎng)器皿中央生長密集,,邊緣稀疏
l 原因:十字法或8字法混勻時(shí)搖晃次數(shù)過多,液體形成漩渦所導(dǎo)致
l 解決方案:繼續(xù)培養(yǎng)1-2天,,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,,重新消化接種。在混勻時(shí)搖晃5-6次即可,。
3. 細(xì)胞在培養(yǎng)器皿的半邊生長,,形成明顯分界線
l 原因: 這可能是培養(yǎng)箱架子不平造成的
l 解決方案:可通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱架子以保持水平解決。
4. 細(xì)胞形成同心圓,,并靠邊緣生長
l 原因:這是由于培養(yǎng)箱風(fēng)扇故障或設(shè)備震動(dòng)導(dǎo)致
l 解決方案:在培養(yǎng)器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解,,檢查培養(yǎng)箱風(fēng)扇是否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
總之,,細(xì)胞貼壁不均勻可能是多種因素造成的,,對于前兩種情況,一般是傳代操作造成的,,重新接種即可解決,;而后兩種情況是硬件設(shè)施造成的,則需要調(diào)試設(shè)備,。
同學(xué)們?nèi)绻杏龅狡渌N壁不均勻的情況,,可以在下方評論區(qū)留言哦。
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