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創(chuàng)傷弧菌:生態(tài)分布、致病特性與實(shí)驗(yàn)室診斷

來(lái)源:武漢市灰藻生物科技有限公司   2024年04月30日 11:21  

引言

創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)是一種革蘭氏陰性、兼性厭氧、彎曲桿狀,、具運(yùn)動(dòng)性的Gammaproteobacteria,,屬于 Vibrionaceae科的Vibrio屬,。與霍亂弧菌(Vibrio cholerae)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)并列為致病性弧菌屬成員。該菌最初于1976年末以Beneckea vulnifica之名被描述為獨(dú)立菌種,,后于1979年更正命名為創(chuàng)傷弧菌,。其主要棲息于溫暖的海水及河口生態(tài)系統(tǒng)中,是導(dǎo)致人類胃腸炎,、敗血癥和傷口感染的常見(jiàn)病原體,。依據(jù)生物型劃分,創(chuàng)傷弧菌可細(xì)分為三類:生物型1關(guān)聯(lián)于人類感染,,生物型2涉及人類及鰻魚(yú)(魚(yú)類)感染,,而生物型3則與魚(yú)類處理人員的傷口感染相關(guān)。


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的生物學(xué)系統(tǒng)分類

域:細(xì)菌域(Bacteria)

門(mén):假單胞菌門(mén)(Pseudomonadota)

綱:γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)

目:弧菌目(Vibrionales)

科:弧菌科(Vibrionaceae)

屬:弧菌屬(Vibrio)

種:創(chuàng)傷弧菌(V. vulnificus)


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的生活習(xí)性

創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)是一種海洋細(xì)菌種類,,通常在全球范圍內(nèi)分布于沿海地區(qū),、河口、咸淡水,、三角洲以及其他含有溫暖鹽水的環(huán)境中,。此外,它也被發(fā)現(xiàn)在較深的海洋表面存在,。

該菌主要與諸如牡蠣(尤其是),、貝類、蟹類乃至高等魚(yú)類等海洋動(dòng)物相關(guān)聯(lián),。通過(guò)這些海產(chǎn)品,,創(chuàng)傷弧菌得以接觸人類并引發(fā)疾病。


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的形態(tài)

創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)具有形態(tài)多變性,通常呈現(xiàn)出兩種形態(tài)迥異的狀態(tài):在休眠的非培養(yǎng)存活狀態(tài)(VBNC狀態(tài))呈圓形,,而在活躍狀態(tài)下則呈彎曲桿狀,。

處于VBNC狀態(tài)時(shí),創(chuàng)傷弧菌呈現(xiàn)為直徑約0.3微米的小球狀,,這一階段常見(jiàn)于低營(yíng)養(yǎng),、低溫(5℃或更低)環(huán)境。

在正?;钴S狀態(tài)下,,其表現(xiàn)為長(zhǎng)度約為3微米、寬度約為0.7微米的彎曲桿菌,。

創(chuàng)傷弧菌

圖1,、創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的培養(yǎng)

對(duì)于Vibrio屬細(xì)菌的培養(yǎng),樣品需首先在如堿性蛋白胨水等富集肉湯中進(jìn)行增殖,,隨后可在不同培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇性分離和鑒定,。

用于分離創(chuàng)傷弧菌(V. vulnificus)的培養(yǎng)基種類多樣,常用的包括TCBS(硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖)瓊脂培養(yǎng)基,、CHROMagar Vibrio培養(yǎng)基,、血液瓊脂培養(yǎng)基以及胰蛋白胨大豆培養(yǎng)基。

另有選擇性培養(yǎng)基可供使用,,如改良纖維二糖多粘菌素B慶大霉素(mCPC)培養(yǎng)基和創(chuàng)傷弧菌專用培養(yǎng)基(VVM),。此類培養(yǎng)基含有如多粘菌素B和慶大霉素等抗生素,pH偏堿且含適量鹽分,,能夠抑制其他微生物的生長(zhǎng),。

在TCBS培養(yǎng)基上,創(chuàng)傷弧菌形成小而圓,、綠色的菌落,。

在血液瓊脂培養(yǎng)基上,創(chuàng)傷弧菌產(chǎn)生直徑約3毫米,、光滑,、乳白色或灰白色、不溶血或α-溶血的菌落,。


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的生化特性

一般生化試驗(yàn)

一般生化特性創(chuàng)傷弧菌
莢膜可變
過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性(+)
檸檬酸鹽利用試驗(yàn)臨床分離株陰性(-),,環(huán)境分離株可變
鞭毛陽(yáng)性(+)
產(chǎn)氣試驗(yàn)陰性(-)
革蘭染色革蘭陰性桿菌
硫化氫試驗(yàn)陰性(-)
吲哚試驗(yàn)臨床分離株陽(yáng)性(+),環(huán)境分離株可變
運(yùn)動(dòng)性運(yùn)動(dòng)
甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性(+)
硝酸鹽還原陽(yáng)性(+)
氧化酶陽(yáng)性(+)
ONPG試驗(yàn)陽(yáng)性(+)(生物型3成員除外)
好氧發(fā)酵兼性厭氧
在1%至6%NaCl中生長(zhǎng)陽(yáng)性(+)
TSI試驗(yàn)A/A,,無(wú)氣泡,,無(wú)硫化氫
尿素酶陰性(-)
Voges-Proskauer試驗(yàn)陰性(-)

碳水化合物發(fā)酵試驗(yàn)

碳水化合物創(chuàng)傷弧菌
L-阿拉伯糖陰性(-)
苦杏仁苷陽(yáng)性(+)
D-阿東醇陰性(-)
纖維二糖陽(yáng)性(+)(生物型3成員除外)
D-甘露醇陰性(-)
D-半乳糖陽(yáng)性(+)
葡萄糖陽(yáng)性(+)
果糖陰性(-)
甘油陰性(-)
乳糖陽(yáng)性(+)(生物型3成員除外)
蜜二糖陰性(-)
麥芽糖陽(yáng)性(+)
甘露醇可變
D-甘露糖陽(yáng)性(+)
R-鼠李糖陰性(-)
蔗糖可變
山梨醇陰性(-)
蔗糖陽(yáng)性(+)
木糖陰性(-)

酶解試驗(yàn)

酶解試驗(yàn)創(chuàng)傷弧菌
精氨酸脫水酶陰性(-)
DNA酶陽(yáng)性(+)
鞣酸水解可變
明膠酶陽(yáng)性(+)
賴氨酸脫羧酶陽(yáng)性(+)
β-半乳糖苷酶陽(yáng)性(+)
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶臨床樣本陽(yáng)性(+),環(huán)境分離株可變
色氨酸脫氨酶陰性(-)


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的致病性

創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)是一種致命的致病性弧菌,,可導(dǎo)致人類及部分海洋生物患病,。在人類中,創(chuàng)傷弧菌主要與傷口感染、胃腸炎和敗血癥相關(guān),。在美國(guó)及沿海地區(qū),,它是與海鮮相關(guān)的死亡和疾病主要原因,約占這些地區(qū)由弧菌所致死亡病例的90%,。

創(chuàng)傷弧菌感染的死亡率高——傷口感染病例中約25%,,敗血癥病例中約50%,胃腸炎病例中約33%——即使接受治療也是如此,。高死亡率主要?dú)w因于內(nèi)毒素休克以及肝病患者,、免疫功能低下者、糖尿病患者,、HIV感染者等群體的易感性,。

美國(guó)頻繁報(bào)告創(chuàng)傷弧菌疾病暴發(fā)事件,通常發(fā)生在夏季,。記錄病例最多的國(guó)家包括美國(guó),、韓國(guó)、中國(guó)臺(tái)灣,、日本和墨西哥,。美國(guó)東南部沿海地區(qū)如佛羅里達(dá)、得克薩斯,、阿拉巴馬,、路易斯安那,、密西西比及其附近區(qū)域創(chuàng)傷弧菌感染發(fā)生率較高,。墨西哥灣是創(chuàng)傷弧菌相關(guān)感染暴發(fā)的另一熱點(diǎn)地帶。亞洲,、中東及歐洲溫暖地區(qū)的沿海地帶亦為該病的流行區(qū),。


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的毒性因子

已發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)具有多種參與致病過(guò)程的毒力因子。以下列舉了其中一些重要毒力因子:

多糖莢膜:有助于病原體逃避人體免疫細(xì)胞的吞噬作用,。

內(nèi)毒素:該菌的脂多糖(LPS)雖不足以激活免疫系統(tǒng)產(chǎn)生細(xì)胞毒性TNF和細(xì)胞因子,,但在傷口感染中可誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。莢膜蛋白能夠觸發(fā)免疫應(yīng)答,,導(dǎo)致患者出現(xiàn)休克癥狀,。

外毒素:胞外溶血素/細(xì)胞毒素、MARTX毒素以及金屬蛋白酶均為該菌分泌的有毒化合物,,可導(dǎo)致宿主細(xì)胞/組織破壞,,有助于其在體內(nèi)擴(kuò)散。

從轉(zhuǎn)鐵蛋白獲取鐵:創(chuàng)傷弧菌能捕獲與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的鐵,,并將其用于自身代謝,。

創(chuàng)傷弧菌MARTX毒素

圖2、創(chuàng)傷弧菌MARTX毒素對(duì)導(dǎo)致血栓形成的人類紅細(xì)胞促凝血和促血栓形成活性的影響


創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)的實(shí)驗(yàn)室診斷與鑒定

確認(rèn)創(chuàng)傷弧菌及其感染主要采用包括培養(yǎng)與生化鑒定、血清學(xué)分析及分子分析在內(nèi)的多種技術(shù)手段,。

顯微鏡觀察與生化表征 采集血液,、傷口拭子、糞便,、組織活檢等臨床標(biāo)本,,在適宜培養(yǎng)基(常用TCBS)上進(jìn)行培養(yǎng),對(duì)發(fā)育的菌落進(jìn)行宏觀和微觀觀察,,并進(jìn)行生化特征鑒定,。

免疫學(xué)檢測(cè) 利用ELISA和凝集試驗(yàn)檢測(cè)樣本中創(chuàng)傷弧菌抗原,以及患者血清中針對(duì)創(chuàng)傷弧菌抗原的抗體,。

分子方法 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是最快速,、準(zhǔn)確的方法,用于檢測(cè)任何標(biāo)本中是否存在創(chuàng)傷弧菌,。此外,,還可用菌落雜交測(cè)試和DNA探針檢測(cè)法進(jìn)行快速鑒定。


總結(jié)

創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)作為海洋環(huán)境中的一種致病性弧菌,,其分布廣泛,、形態(tài)多變、生活習(xí)性,,且具有高致病性和復(fù)雜的毒力機(jī)制,。該菌與貝類、蟹類,、魚(yú)類等海洋生物緊密相關(guān),,通過(guò)食物鏈途徑感染人類,引發(fā)胃腸炎,、敗血癥和致命性傷口感染,。其致病性源于多糖莢膜的免疫逃避、內(nèi)毒素引起的炎癥反應(yīng),、外毒素如MARTX毒素對(duì)細(xì)胞組織的破壞,,以及高效的鐵質(zhì)攝取能力。疾病暴發(fā)多集中在夏季,,以美國(guó)東南部,、墨西哥灣及亞洲、中東,、歐洲等溫暖沿海地區(qū)為高發(fā)區(qū),。實(shí)驗(yàn)室診斷創(chuàng)傷弧菌涉及多種技術(shù)手段,包括傳統(tǒng)的培養(yǎng)與生化鑒定,、血清學(xué)檢測(cè),,以及現(xiàn)代分子方法如PCR,。這些方法共同構(gòu)成了識(shí)別病原體、輔助臨床診斷及制定治療方案的重要工具,。綜上所述,,創(chuàng)傷弧菌作為一種嚴(yán)重的海洋源性病原體,其生態(tài)分布,、致病機(jī)制,、臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室診斷方法的研究對(duì)于預(yù)防和控制相關(guān)疾病的發(fā)生具有重要意義。


【相關(guān)資源】

名稱:創(chuàng)傷弧菌 | Vibrio vulnificus (Reichelt et al.) Farmer emend. West et al.

菌株編號(hào):HZB355259

微生物資源鑒定保藏平臺(tái)


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更新日期:2024-04-30

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