手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
在分子生物學領域,，限制性內切酶（Restriction Endonucleases）是一類重要的酶,，能夠識別特定的DNA序列并在其特定位置切割雙鏈DNA，從而產生特定的DNA片段,。這些酶被廣泛應用于DNA重組,、基因克隆、PCR等實驗中,。以下是20種常用的限制性內切酶及其相關應用介紹,，以及在實驗中需要注意的事項。
1. EcoRI
- 序列識別：GAATTC
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中,。
- 注意事項：適宜的反應緩沖液和適當?shù)臏囟葘Ψ磻Ч陵P重要,。
2. HindIII
- 序列識別：AAGCTT
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。
- 注意事項：應注意避免酶的過度消耗和不必要的環(huán)境污染,。
3. BamHI
- 序列識別：GGATCC
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中,。
- 注意事項：反應條件的優(yōu)化對保證酶的活性和特異性至關重要。
4. XhoI
- 序列識別：CTCGAG
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中,。
- 注意事項：應避免酶與RNA的結合,，以免影響實驗結果。
5. EcoRV
- 序列識別：GATATC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：在反應中應嚴格控制酶的濃度,，避免過度消耗。
6. SalI
- 序列識別：GTCGAC
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中,。
- 注意事項：酶的保存和使用條件對保持其活性至關重要,。
7. XbaI
- 序列識別：TCTAGA
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。
- 注意事項：應避免酶的不必要凍融和長時間存放,。
8. PstI
- 序列識別：CTGCAG
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：應選擇適宜的反應緩沖液，以確保酶的最佳活性,。
9. SmaI
- 序列識別：CCCGGG
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：酶的反應條件需要在酶活性和DNA完整性之間取得平衡。
10. NotI
- 序列識別：GCGGCCGC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：應避免酶與DNA的過度反應,，以免影響DNA片段的完整性。
11. KpnI
- 序列識別：GGTACC
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中,。
- 注意事項：反應體系中的離子濃度和pH值對酶的活性有重要影響,，應予以嚴格控制。
12. SacI
- 序列識別：GAGCTC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：反應溫度和時間的選擇對酶的活性和特異性至關重要,。
13. SphI
- 序列識別：GCATGC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。
- 注意事項：應避免酶與反應體系中的其他成分發(fā)生不必要的相互作用,。
14. EcoRII
- 序列識別：CCWGG
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：酶的保存和稀釋應避免超過其最佳活性濃度,。
15. BglII
- 序列識別：AGATCT
- 應用：常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。
- 注意事項：反應體系中的酶和DNA的比例應適當控制,，以避免浪費和不必要的反應,。
16. AvaI
- 序列識別：CYCGRG
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。
- 注意事項：反應體系中的離子濃度和溫度需要仔細控制,，以確保酶的最佳活性,。
17. NdeI
- 序列識別：CATATG
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。
- 注意事項：酶的保存和凍融條件對其活性和穩(wěn)定性至關重要,。
18. SstI
- 序列識別：GAGCTC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：應選擇適宜的反應緩沖液和反應溫度，以保證酶的活性和特異性,。
19. BstEII
- 序列識別：GGTNACC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：反應時間和酶的濃度需要進行優(yōu)化，以獲得最佳的實驗結果,。
20. HpaI
- 序列識別：GTTAAC
- 應用：常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中,。
- 注意事項：酶的穩(wěn)定性受到環(huán)境條件的影響，應在適宜的溫度下保存和使用,。
限制性內切酶在分子生物學實驗中很常用,，其特異性識別和切割DNA序列的能力使其成為DNA重組、基因克隆和PCR等實驗的關鍵工具,。然而，在使用限制性內切酶時,，也需要注意一些重要事項,，如優(yōu)化反應條件、嚴格控制酶的濃度,、避免酶的過度消耗和不必要的環(huán)境污染等,，以確保實驗能夠順利進行并獲得可靠的結果。更多實驗室儀器,，實驗耗材,，科研試劑請進入蘇州阿爾法生物進行咨詢
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,，未經本網授權不得轉載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,，應在授權范圍內使用,，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者,，本網將追究其相關法律責任,。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品,，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任,。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,，必須保留本網注明的作品第一來源,，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容,、版權等問題,，請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系，否則視為放棄相關權利,。
采購中心