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免疫組化中抗體的加入
這看似很簡單的問題,，如果處理不好也可導(dǎo)致不同的結(jié)果，如果應(yīng)用自動免疫組織化學(xué)染色儀,，將程序輸入即可,，
如為手工操作,，就必須注意以下的問題：
1.當 PBS 沖洗完畢后，在加入抗體,，如一抗,，二抗或三抗,。必須將存留于切片上的多余的PBS 摔干，但不能讓切片干涸,，切片干涸,，往往可產(chǎn)生非特異性染色，切片上PBS 存留過多,，將會稀釋加入的抗體,，影響加入抗體的濃度，同時也將影響最后的結(jié)果,，如假陰性等,。
2.加入的抗體以一滴為佳。當擦干組織塊周邊多余的 PBS 后,，切片保持著一定的濕潤度,，此時加入另外的抗體為最佳時候，滴入抗體以一滴 50ml 為好,，加入后,，輕微地搖勻地覆蓋于切片上，使最后的結(jié)果穩(wěn)定均衡,，不至于有的地方有反應(yīng),，有的地方無反應(yīng)。
3.切片沒擦好將會影響加入抗體的質(zhì)量,，切片沒沖洗干凈,，沒擦試好，當加入抗體后,，它可縮于切片的一邊,，此時你為了使加入的抗體能夠地覆蓋整個切片，便會使勁地加入抗體,，此時的結(jié)果是,，抗體依然滑向一邊，或者露出,，這不光沒達到目的,，還浪費抗體，正確的做法就是地用 PBS 沖洗,，摔干切片擦干切片周邊的 PBS,，再滴入一滴抗體輕輕搖勻即可。
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