1.培養(yǎng)溫度的要求總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外,，在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,，但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的合適溫度為25℃左右，如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,，但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,，則不再生長,，而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌，習(xí)慣于37℃左右生長,，如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長,。

因此，可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分,，兩種方法也都基于此理,。
將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時，箱內(nèi)溫度一定要達(dá)到所要求的溫度(44.5±0.5℃)時,，方可放入,。

如用恒溫水浴箱時，其水面要高于接種物面,，放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部,。

2.加氯水樣的處理經(jīng)氯處理消毒過的水樣，水中含有一定量的余氯,，使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),，在采集水樣時應(yīng)提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉，硫代硫酸鈉可以脫氯,，使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),，從而避免出現(xiàn)計數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細(xì)菌其抑制作用尤為明顯,，所以抽濾時應(yīng)對水樣進(jìn)行大量無菌水稀釋,，以減少余氯的殘留。

3.樣品的保存采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋,，用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,，置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h，或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min,。
采樣后水樣的正確保存也很重要,，如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長，這些都將影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
檢測室接到水樣后,，應(yīng)立即檢測，如因故不能檢測時,，應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時內(nèi)檢測,。