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關(guān)于克倫特羅檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理及注意事項(xiàng)
克倫特羅檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
本試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗克倫特羅抗原,。檢測(cè)時(shí),，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,，克倫特羅抗體及酶標(biāo)記物,，包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競(jìng)爭(zhēng)性地與克倫特羅抗體結(jié)合后，再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,，用TMB底物顯色,；加入反應(yīng)終止液，在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測(cè),，樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強(qiáng)度成反比,。
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí)，都須注意：
實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭,。
實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具,，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
注意事項(xiàng)
室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫（20-25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作,。
反應(yīng)終止液為2M硫酸,，避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上，請(qǐng)盡快用水沖洗,。
不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒,；也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低,；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑,。
保存試劑盒于2-8℃，不要冷凍,，將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封,。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下,。
顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450nm）值小于0.5（A450nm<0.5 ）時(shí),，表示試劑可能變質(zhì),。
在加入底物液后，一般顯色15分鐘即可,。若顏色較淺,，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20分鐘（或更長(zhǎng)），但不得超過(guò)30分鐘,。反之,，則減短反應(yīng)時(shí)間。
該試劑盒佳反應(yīng)溫度為25℃,，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化,。
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