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(DHA)對大鼠骨關(guān)節(jié)炎動物模型(OA)關(guān)節(jié)軟骨組織退變的影響

來源:吉奧藍圖(廣東)生命科學(xué)技術(shù)中心   2023年07月25日 09:34  

  摘要
  骨關(guān)節(jié)炎模型,動物模型,構(gòu)建動物模型實驗,動物造模,大鼠模型,模型大鼠
  骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis, OA)是一種關(guān)節(jié)慢性退行性疾病,主要臨床癥狀為關(guān)節(jié)疼痛,、僵硬,、畸形和功能障礙,。
  OA通常發(fā)生于老年人,研究表明超過一半的65歲以上老年人都有癥狀性或影像學(xué)上的OAP,。OA會導(dǎo)致患者肢體殘疾和生活質(zhì)量嚴重下降,,其主要治療方式包括減少關(guān)節(jié)負重、藥物治療,、物理治療和手術(shù)治療,。
  二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是一種n-3多不飽和脂肪酸,與二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)相同,,不飽和雙鍵起始于甲基端的第3個碳原子上,。DHA和EPA的天然來源主要是海洋動物,如貝類,、甲殼類,、魚類,特別是鰭,、鮭、鯡,、沙丁魚等,,是飲食中重要的營養(yǎng)物質(zhì)。
  研究發(fā)現(xiàn),DHA對多個系統(tǒng)具有廣泛而明確的抗炎作用,,并應(yīng)用于包括心血管疾病,、炎癥性腸病、肥胖,、糖尿病,、非酒精性脂肪肝等多種炎癥性疾病的實驗動物模型和臨床試驗中。但目前DHA對OA炎癥反應(yīng)的抑制活性及其對關(guān)節(jié)軟骨的保護能力尚不清楚,。
  本研究在體外實驗中,,利用大鼠OA模型測定DHA對OA關(guān)節(jié)軟骨的影響,并測定細胞凋亡,、自噬及炎癥相關(guān)蛋白的表達,,以了解DHA對OA關(guān)節(jié)軟骨的影響及機制。
  目的
  研究二十二碳六烯酸(DHA)對大鼠骨關(guān)節(jié)炎(OA)關(guān)節(jié)軟骨組織退變的影響,,并初步探討其機制,。
  方法
  手術(shù)切除內(nèi)側(cè)半月板、切斷前交叉韌帶構(gòu)建大鼠OA動物模型,,并采用富含DHA的飼料喂養(yǎng),;同時采用假手術(shù)或正常飼料喂養(yǎng)進行對照。HE染色,、甲苯胺藍染色,、番紅O-固綠染色觀察關(guān)節(jié)軟骨組織退變程度,采用改良Mankin評分評價番紅O-固綠染色標本關(guān)節(jié)軟骨組織損傷,;采用免疫組織化學(xué)染色法檢測關(guān)節(jié)軟骨組織中Ⅱ型膠原的表達,;采用蛋白印跡法檢測關(guān)節(jié)軟骨組織中哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13),、Beclin-1及通路蛋白磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(p-ERK),、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化p38蛋白(p-p38)的表達,;microCT觀察軟骨下骨的結(jié)構(gòu)變化,。
  結(jié)果
  口服DHA減輕OA大鼠關(guān)節(jié)軟骨退變程度,并顯著降低Mankin評分,;免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示DHA可提高軟骨細胞Ⅱ型膠原陽性表達率,;蛋白印跡法檢測結(jié)果顯示DHA可減少關(guān)節(jié)軟骨組織中mTOR和MMP-13的表達,并增加Beclin-1的表達,;microCT顯示DHA可改善骨小梁微細結(jié)構(gòu),,減少軟骨下骨囊變及硬化;通路蛋白檢測顯示DHA可顯著抑制p-p38的表達,。

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  結(jié)論
  DHA可有效減輕OA大鼠關(guān)節(jié)軟骨退變及損傷,,并改善軟骨下骨微細結(jié)構(gòu),。這一作用通過增加軟骨細胞Ⅱ型膠原和Beclin-1的表達,并降低mTOR和MMP-13的表達而實現(xiàn),。DHA的作用機制為抑制p38通路,。

 

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