1.超凈工作臺
目前絕大部分細胞實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作,,具有操作簡單,、安裝方便,、占用空間小且凈化效果很好,。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側流式(垂直式)和外流式(水平層流式),。工作原理一般是將室內空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,,再經(jīng)高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),,從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境,。
?。?)側流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,,形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌,,工作臺結構為封閉式;
?。?)外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,,因而外方氣流不致混入操作,工作臺結構為開放式,,但進行有害物質實驗操作對操作者不利,。超凈工作臺應需要定期請有關部門檢查潔凈度,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級,,用塵埃粒子計數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應超過3.5個/L,;空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s;細菌菌落數(shù)平均<1個,,根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器,。
2.顯微鏡
倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)設備,主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生,。如資金允許,,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質相差顯微鏡、解剖顯微鏡,、熒光顯微鏡,、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等,可隨時拍攝并記錄細胞生長情況,。
3.培養(yǎng)箱
體外培養(yǎng)的細胞和體內細胞一樣,,需要在恒定的溫度下生存,一般最適生長溫度為37℃,,溫差變化不應超過±0.5℃,。溫度升高2℃時,變不利于細胞生存,,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡,。因此,可精確控溫的恒溫培養(yǎng)箱,、CO2培養(yǎng)箱是,。
(1)恒溫培養(yǎng)箱:應選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜,其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng),。
?。?)CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),,易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,,適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時,,為使培養(yǎng)瓶內與外界保持通氣狀態(tài),,可將瓶蓋略微旋松,為避免細胞被污染,,使用這種培養(yǎng)方式時,,培養(yǎng)箱內空氣必須保持清潔,需定期用紫外線照射或酒精消毒,,同時培養(yǎng)箱內應放置盛有無菌蒸餾水的水槽,,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),保持箱內相對濕度在100%,。
?。?)細胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,。
4.烘箱(干燥箱)
用于細胞培養(yǎng)的一些器械,、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒,。干熱消毒時,,烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱,。其優(yōu)點是溫度均勻,、效果較好,缺點是升溫過程較慢,。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,,至100℃時,停止鼓風,。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。
5.水純化裝置
細胞培養(yǎng)對水的質量要求較高,,細胞培養(yǎng),、細胞培養(yǎng)相關液體的配制用水以及清洗細胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴格的純化處理,。目前有多種純化方法相結合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,,可掛壁式,、臺式、可配儲水箱,、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能,,有效去除DNA酶,、RNA酶、蛋白酶等,,更有可有效去除掉熱源,、內毒素的超濾型純水裝置。
6.冰箱
細胞培養(yǎng)實驗室設備,,應專用,,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質,,且應保持清潔,。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱,。
普通冰箱:儲存培養(yǎng)液,、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,,可短期保存組織樣本,。
-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑,,如酶,、血清等。
7.細胞冷凍儲存器
儲存器常用的液氮容器,,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格,。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小、取放使用方便,、液氮揮發(fā)量,。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的凍存管250-15000個左右,。液氮溫度低文帝可達-196℃,,使用時應注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),,需注意觀察剩余液氮量,,及時補充,避免液氮不足使細胞受損或死亡。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,,可配置有電子控制器的液氮儲存器,,實現(xiàn)凍存自動化;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,,確保樣品溫度始終處于設定溫度點,;可配置報警系統(tǒng),設置液氮液面,、溫度,、電池、電壓,、電源等失常情況下報警,;同時具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐,,從而更有效地保護樣品,,防止容器內升溫。另外,,可選擇液氮供應罐通過連接管給儲存罐補充液氮,,保證樣品安全。
8.離心機
細胞培養(yǎng)時,,通常使用離心機制備細胞懸液,、調整細胞密度、洗滌和收集細胞,。一般常規(guī)配置4000rpm臺式離心機,;若要做細胞沉降,需要使用80-100G離心力,,因為離心力過大會損傷細胞,。根據(jù)不同要求,有大容量,、可調溫度離心機,、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇。
9.天平
常用的有精密天平和分析天平,。分析天平的精確度一般為0.1mg,、0.01mg和0.001mg。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用精確度0.1mg的天平,;取樣量100-10mg,,選用精確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用精確度0.001mg的天平,。天平需要定期校準,,可選擇有自動校準功能的天平,,方便維護。天平使用需要注意清潔,,避免腐蝕性粉末,、液體直接接觸稱量臺。
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任,。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任,。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容,、版權等問題,,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利,。