脂質(zhì)納米粒LNPs作為mRNA遞送的首先載體,。LNPs主要通過陽離子的磷脂材料與其他輔助磷脂完成顆粒的構(gòu)建,，通過RNA所帶的負(fù)電與陽離子磷脂的正電相互吸附，可實(shí)現(xiàn)較高的包載效果,，并且在體內(nèi)由低密度脂蛋白介導(dǎo)的胞吞機(jī)制可使納米粒子成功被細(xì)胞攝取,，實(shí)現(xiàn)良好的細(xì)胞攝取效果。

R-SHM處方工藝篩選芯片盒,，使用次數(shù)根據(jù)不同的測(cè)試條件可以＞30次*或＞100次**,。

備注：

*采用處方BNT空白LNP處方測(cè)試，測(cè)試條件為1:3,，總流速12ml/min,總體積為10ml,，粒徑和PDI能保持一致,。

**采用純乙醇測(cè)試,，測(cè)試條件為1:1，總流速20ml/min,總體積為10ml,，芯片無泄露,。采用BNT處方，粒徑和PDI能與新芯片保持一致,。

流速范圍：1ml/min-20ml/min,。

R-SHM芯片除酶除熱原流程

試劑

?

75%乙醇，

0.5MNaOH 溶液,，

無水乙醇,， 

DEPC 水

?

1,、芯片使用前清洗

?

01

75%乙醇清洗

?

用 2 支 2.5ml 注射器各取 2ml 75%乙醇，

調(diào)用“清洗程序”的方法

(兩相比例=1:1,，總體積 4ml,，流速 12ml/min)

取 15ml 離心管掛上機(jī)器左邊的收集管卡槽

點(diǎn)擊軟件運(yùn)行。

02

0.5MNaOH 溶液清洗

?

用 2 支 2.5ml 注射器,，

各取 0.5MNaOH 溶液,，

重復(fù)上述操作條件清洗。

清洗后靜置 1小時(shí),。

03

殘余液體排空

?

用 2 支 2.5ml 注射器,，

抽滿空氣，

插入芯片,，

重復(fù)上述操作條件排空,。

04

無水乙醇—DEPC水

?

用 2 支 5ml 注射器，

各取無水乙醇,，DEPC 水 5ml,，

軟件設(shè)置

（兩相比例=1:1，總體積10ml,流速 12ml/min）,，

具體操作如上,，重復(fù)清洗 3 次，

排空殘余液體,。

                  清洗步驟：

?

無水乙醇-DEPC 水清洗→

75%乙醇清洗→

0.5MNaOH 溶液清洗→

殘余液體排空→

無水乙醇-DEPC 水清洗3次→

殘余液體排空 

注意：溶液的抽取體積應(yīng)大于軟件設(shè)置體積,。