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解析：細胞生長緩慢的原因

來源：武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 2022年10月14日 09:21

就一個實驗室而言無論運作的多么好,，總會因為革新技術(shù)或拓展方向二影響原來的流程,，從而產(chǎn)生各種各樣的問題。有些地方錯誤的操作有可能帶來嚴重的后果,，那么今天主要列舉細胞生長緩慢的兩大原因,。

培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題

檢查你所培養(yǎng)的細胞是否存在污染。

（1）如果培養(yǎng)細胞未添加抗生素,，細胞污染則是不可避免的,。

① 用肉眼和顯微鏡進行檢查。

② 如果細胞被污染則要棄掉,。

（2）由于支原體污染不容易覺察到,，因此必須定期檢測。

（3）檢測可能污染的途徑和原因,。

檢查你用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基和血清（例如：是否批次不同或廠商不同）,。如果你常規(guī)使用的是粉劑或10×儲存液,，而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1×液體，而隨后證明問題就出自于此,。

如果問題與培養(yǎng)基無關(guān),，那么很可能還是細胞的問題。

（1）復(fù)蘇另一支凍存的細胞,，并且與正在培養(yǎng)的細胞加以比較,。兩種細胞的培養(yǎng)應(yīng)分開，以免在培養(yǎng)之初就產(chǎn)生污染,。隨后按（2）～（4）步的方法做排查,。

（2）對傳代培養(yǎng)的細胞進行計數(shù)，并繪制生長曲線,，與以前培養(yǎng)該細胞的資料進行比較,，檢查是否有下列改變:

① 傳代時是否接種密度過低。

② 細胞傳代是否過于頻繁,。

③ 傳代前細胞平臺期是否過長。

（3）是否更換了胰蛋白酶或其他分離劑的批號,，檢查批號和供貨商,。

（4）是否細胞分離過程中嚴重損傷了細胞，應(yīng)檢測:

① 胰蛋白酶（其他消化試劑）消化時間是否過長,。

② 消化液的濃度和活性是否過高,、過強。

③ 胰蛋白酶消化時,，孵箱溫度是否過高,。

④ 吹打消化細胞時是否過于用力。

⑤ 細胞是否對 EDTA過于敏感（如果添加了EDTA）,。

⑥ 胰蛋白酶稀釋是否有誤,。

⑦ 是否使用了一批劣質(zhì)的胰蛋白酶消化液。

檢查共用的設(shè)備和試劑

溫度和孵箱濕度

溫度設(shè)定不準(zhǔn)

a　自動調(diào)溫器損壞,。

b　開關(guān)孵箱門過于頻繁,。

c　孵箱門未關(guān)緊。

d　風(fēng)扇損壞造成散熱不均,。

孵箱濕度不能維持

a　水盤中未加水,。

b　孵箱有滲漏。

c　開關(guān)孵箱門過于頻繁,。

d　在Petri培養(yǎng)皿中放置一定量的PBS,，每日稱重，以檢查蒸發(fā)率。

孵箱的CO2濃度不準(zhǔn)

a　開關(guān)孵箱門過于頻繁,。

b　CO2控制器出現(xiàn)問題,。

產(chǎn)/品/推/薦

產(chǎn)品名稱：BEAS-2B(人正常肺支氣管上皮細胞)

貨號：SNL-203

產(chǎn)品名稱：特級胎牛血清（來自南美純正血源）

貨號：SNS-002

產(chǎn)品名稱：胰酶（含EDTA）

貨號：SNT-002

公司簡介

武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城，專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā),、生產(chǎn)和服務(wù),，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實驗室、動物房,，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認證,，獲得企業(yè)、3551人才,、瞪羚企業(yè),、科技小巨人等多項榮譽?！　?/span>

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系,、原代細胞,、胎牛血清,、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基,、輔助試劑等系列產(chǎn)品,，提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購；細胞庫凍存細胞系500余種,，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類,；公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等,?！　?/span>

公司細胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機構(gòu)及一些生物科研,、診斷,、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),！尚恩生物—您專業(yè)的細胞供應(yīng)商,！

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