標(biāo)曲顯色過強(qiáng)無明顯梯度
1,、主要懷疑點(diǎn):洗板不充分。
2,、機(jī)器洗版:確保機(jī)器設(shè)置的針頭能吸干孔中液體,,并且加液針頭能加液大于350ul,加液針頭沒有被異物或者結(jié)晶鹽堵住,。
3,、手動洗板,嚴(yán)格按照步驟,,使用干凈滅菌的槍頭和加樣槽,,使用無氧化劑的吸水紙。加350ul洗液,,靜置90秒,,在吸水紙上拍干孔中液體后再加入下一步洗液或者試劑。
4,、特別注意,,在加入TMB前的洗板步驟極其重要,殘留的HRP酶會直接導(dǎo)致TMB顯色,。
5,、TMB 已經(jīng)污染,檢測TMB是否透明無色,如果偏藍(lán)就是污染了,。
6,、檢查配制洗液的水是否污染,要求使用的水是雙蒸水,,三蒸水或無離子水,,水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬,以及HClO都會氧化TMB,。
7,、酶標(biāo)板受潮,長霉,,或者試劑過期,。
8、環(huán)境污染,,空氣中有導(dǎo)致顯色的物質(zhì)或者粉塵,。
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