手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng),、引種,、保種和保證實驗順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,，及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的,。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細(xì)胞,、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是不可少的實驗操作,。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染,、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實驗失敗,，如果沒有原始細(xì)胞的凍存，則因為上述的意外而前功盡棄,。
細(xì)胞凍存常用凍存液的成分如下：
20%血清(FBS),、10%DMSO、70%1640培養(yǎng)液,；或90%血清(FBS),、10%DMSO，更可防止細(xì)胞內(nèi)冰晶形成,。將DMSO和FBS加入DMEM中,，各自含量占總體積的10%，然后濾膜過濾后分裝保存?zhèn)溆谩?br />
注意事項：
1.DMSO 不用高壓滅菌;DMEM不能高溫高壓滅菌,，可以過濾除菌,。
2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存,。
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(體積比),。
DMSO在凍存液中的作用： DMSO在4℃時對細(xì)胞無明顯毒性,，分子量小、溶解度大,、易透過細(xì)胞膜,，降低細(xì)胞外未結(jié)冰溶液中溶質(zhì)濃度，使細(xì)胞免受高濃度溶質(zhì)的損傷,細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲,，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮,；DMSO與水分子結(jié)合，可使冰點下降,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少冰晶損傷。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品,，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題,，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。
采購中心