Cyvita MSC細胞凍存液

產(chǎn)品描述

Cyvita MSC細胞凍存液是一種即用型無血清細胞凍存液，采用化學成分明確的無動物源配方,，含10%DMSO及多種細胞營養(yǎng)成分，可顯著提高細胞凍存復蘇存活率,。該產(chǎn)品對各種類型的間充質(zhì)干細胞（MSC）具有非常好的效果,，同時適用于多種動物細胞系（如293T、CHO）,、免疫細胞（如NK,、T、THP1）及其他類型干細胞（如iPSC）的凍存,，具有安全性高（無血清污染風險）,、凍存效果穩(wěn)定、操作簡便等特點,，支持-80℃短期儲存（6個月）及非程序化凍存,，是替代傳統(tǒng)血清凍存液的理想選擇。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸,。4℃保存,，有效期18個月。

使用方法

細胞凍存步驟（如圖1）：

1. 使用常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞,，并計數(shù),，確認所需凍存的細胞數(shù)量。

2. 將即凍存細胞收集于離心管中,，1000 rpm 離心 5 min左右,，收集細胞沉淀,，并棄掉上清液。

3. 加入適量PBS重懸細胞沉淀,，1000 rpm 離心 5 min左右,，收集細胞沉淀，并棄掉上清液,。注意：清  洗步驟,，可清洗掉殘留消化液等。

4. 加入適量的凍存液至離心管中,，最后的細胞保存濃度為 1×10⁶至 5×10⁶/mL,，輕柔混勻細胞，形成細胞混合液,。

5. 將細胞混合液按 1~1.5 mL 每管分裝于凍存管中,。

6. 將凍存管直接置于 -80℃ 保存，如需長期凍存,，第二天轉(zhuǎn)移至液氮里保存,。

圖1

細胞復蘇步驟（如圖2）：

1. 先準備體積為凍存液體積9倍的培養(yǎng)基，預溫至室溫或37℃,。

2. 從-80℃取出凍存細胞,，立即放入37℃ 水浴鍋快速解凍，期間不斷搖晃,。待剩余1粒米大小的冰塊時,，迅速移出水浴。

3. 用 75% 酒精擦拭凍存管管壁,，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至15 ml離心管,。

4. 按1:9比例加入預溫（室溫或37℃）的新鮮培養(yǎng)基，混勻,，1000 rpm,，5 min離心，棄上清,，獲取細胞沉淀,。注：稀釋DMSO，防止溫度上升后DMSO產(chǎn)生的細胞毒性,；稀釋后離心棄上清,，殘留的DMSO更少

5. 加入適量預溫的新鮮細胞培養(yǎng)基，輕柔混勻,，并將混合液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器,，觀察細胞狀態(tài)正常后，進行后續(xù)細胞培養(yǎng)工作。

圖2

注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域。

2. 細胞在加入凍存液分裝后,，應減少在外存放時間,，盡快移入到 -80℃ 超低溫冰箱。

3. 對一些難凍存細胞進行凍存時,，建議在使用前對所凍存的胞進行1周以上的試驗性細胞冷凍保存測試,，摸索好凍存條件和確認性能后再進行正式凍存。

4. 本產(chǎn)品含有10% DMSO,，部分對 DMSO 敏感的細胞,，建議對其進行至少1周的本產(chǎn)品試驗性的細胞凍存培養(yǎng)測試，摸索好凍存條件和確認性能后再正式凍存,。

5. 細胞復蘇時,，取出的凍存細胞，應立即放在37℃水浴輕搖,，接近融化時取出,，避免懸液升溫產(chǎn)生DMSO毒性，迅速解凍有助于提高復蘇效率,。

6. 建議復蘇操作將復蘇懸液1:9稀釋后離心收集,，優(yōu)點：稀釋DMSO，防止溫度上升后DMSO產(chǎn)生的細胞毒性,；稀釋后離心棄上清,，殘留的DMSO更少。

7. 對于較為脆弱或珍貴的細胞,，建議在-80°C的存放過夜后，應轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期保存,。

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